miRNA-24对内皮型一氧化氮合酶表达调节及血管内皮细胞增殖的影响

发布时间：2018-01-09 13:06

  本文关键词：miRNA-24对内皮型一氧化氮合酶表达调节及血管内皮细胞增殖的影响　出处：《中国病理生理杂志》2014年08期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：目的:为进一步探讨miRNA-24是否参与内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的调控及其对血管内皮细胞增殖的影响,本研究构建miRNA-24高表达质粒,并用脂质体将其导入人脐静脉内皮细胞(HUVECs),观察miRNA-24对eNOS表达及HUVECs增殖的影响。方法:用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,RT-PCR、免疫组织化学和Western blotting检测eNOS与Sp1转录因子mRNA和蛋白表达水平。结果:与对照组比较,miRNA-24高表达组细胞增殖减慢41.97%(0.47±0.04 vs 0.81±0.03,P0.01),eNOS mRNA降低44.8%(0.48±0.01 vs 0.87±0.03,P0.05),蛋白表达减少71.92%(0.16±0.06 vs 0.57±0.08,P0.05);同时Sp1 mRNA降低53.00%(0.45±0.02 vs 0.93±0.01,P0.05),其蛋白质表达量也相应减少62.31%(0.13±0.07 vs 0.31±0.09,P0.05)。miRNA-24抑制组中,上述指标比对照组降低,但比miRNA-24高表达组明显升高。结论:miRNA-24高表达明显抑制HUVECs的增殖及eNOS的表达;Sp1可能是参与miRNA-24调控eNOS表达的重要因素之一。
[Abstract]:Objective: To investigate whether miRNA-24 is involved in endothelial nitric oxide synthase (eNOS) expression and its effect on the proliferation of vascular endothelial cells, the research on the construction of miRNA-24 high expression plasmid by liposome into the human umbilical vein endothelial cells (HUVECs), to observe the effect of miRNA-24 on the expression of eNOS and proliferation of HUVECs. Methods: using four methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay to detect cell proliferation, RT-PCR, immunohistochemical detection of eNOS and Sp1 transcription factor mRNA and protein expression of blotting and Western chemical level. Results: compared with the control group, the group of miRNA-24 high expression cell proliferation decreased 41.97% (0.47 + 0.04 vs 0.81 + 0.03, P0.01). ENOS mRNA decreased 44.8% (0.48 + 0.01 vs 0.87 + 0.03, P0.05), decreased expression of 71.92% (0.16 + 0.06 vs 0.57 + 0.08, P0.05); at the same time, Sp1 mRNA was reduced by 53% (0.45 + 0.02 vs 0.93 + 0.01, P0.05), the protein expression. Should be reduced by 62.31% (0.13 + 0.07 vs 0.31 + 0.09, P0.05) in.MiRNA-24 group, the index was lower than the control group, but higher than the high expression of miRNA-24 group increased significantly. Conclusion: high expression of miRNA-24 and eNOS significantly inhibit the proliferation of HUVECs; Sp1 may be one of the important factors involved in the regulation of miRNA-24 eNOS expression.

【作者单位】： 广西医科大学药学院;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.81373403) 广西自治区教育厅课题(No.2013YB049)
【分类号】：R363
【正文快照】： 微小RNA(miRNA)是长约22 nt的一类高度保守的内源性非编码单链小RNA,其通过序列特异性方式调控mRNA的降解或抑制蛋白质翻译。约有30%人类基因的表达受到miRNAs的精细调控[1]。近年来研究表明,某些miRNAs参与血管内皮细胞分化、增殖与凋亡的过程[2-3];更重要的是,这类miRNAs不

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