天然及氧化修饰高密度脂蛋白对HepG2细胞MSRG转录影响的初步研究

发布时间：2018-01-15 19:35

  本文关键词：天然及氧化修饰高密度脂蛋白对HepG2细胞MSRG转录影响的初步研究　出处：《四川大学》2007年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】： 为研究代谢综合征(metabolic syndrome,MS)与动脉粥样硬化等疾病之间的关系，本研究室曾通过高糖膳食构建了高甘油三酯血症大鼠模型，其具有代谢综合征的基本特征。用该大鼠模型肝脏基因的差异表达序列片段筛选人肝脏cDNA文库后发现一条新的基因，国内外尚未有关于该基因的报道。该新基因被暂时命名为代谢综合征相关新基因(metabolism syndrome-related novel gene,MSRG)。 为进一步了解MSRG与MS的关系，研究MSRG的功能，我室正在对影响MSRG转录因素进行系列研究。本文以HepG2细胞为研究对象，，通过设计MSRG、β-actin引物及相应的Taqman探针，建立了RealtimePCR定量检测基因转录水平的方法。对HepG2细胞内MSRG转录水平进行检测后，发现MSRG相对于β-actin为低转录基因。 我们用天然高密度脂蛋白(native high density lipoprotein,N-HDL)及氧化修饰高密度脂蛋白(oxidized high density lipoprotein,OX-HDL)孵育HepG2细胞，观察对细胞MSRG转录的影响。结果发现：①在N-HDL 0～100mg/L组及OX-HDL 0～50mg/L组，MSRG转录随N-HDL及OX-HDL浓度的增加有下降趋势。与0mg/L组相比，MSRG在N-HDL 50mg/L、100mg/L组和OX-HDL 50mg/L组转录水平差异具有统计学意义(p＜0．05)。当浓度高于此范围，MSRG转录较最低水平有所升高。与N-HDL 100mg/L组相比，N-HDL 200mg/L组基因转录有所回升，但无统计学差异(p＞0．05)；与OX-HDL 50mg/L组相比，OX-HDL 100mg/L、200mg/L组MSRG mRNA含量有增高趋势，且200mg/L组与50mg/L组间基因转录水平差异具统计学意义(p＜0．05)。②在N-HDL 0～24h组及OX-HDL 0～12h组，MSRG转录随时间延长有下降趋势。与0h相比，N-HDL 12h、24h、36h组基因转录降低(p＜0．05)，24h组MSRG mRNA含量最低；OX-HDL 6h、12h组基因转录较其0h组降低(p＜0．05)，12h组MSRG转录水平最低。当时间超过相应范围后，MSRG转录有回升倾向。与N-HDL 24h组相比，MSRG在N-HDL36h组转录有所回升，但无统计学差异(p＞0．05)；OX-HDL 24h、36h组MSRG转录较其12h组有所回升(p＜0．05)。③分别用100mg/L N-HDL或OX-HDL孵育HepG2细胞12h后，MSRG转录水平均较对照组显著下降(p＜0．05)，但二者间无显著差异。N-HDL、OX-HDL组培养基总胆固醇浓度较孵育前下降，甘油三酯浓度较孵育前上升，但均无统计学差异(p＜0．05)。细胞内糖原、总胆固醇及甘油三酯浓度在三组间均无显著性差异。 我们发现：在低浓度及短时间内，N-HDL及OX-HDL均可降低HepG2细胞MSRG的转录水平。N-HDL较OX-HDL作用更为明显，抑制转录作用的浓度及时间范围均宽于OX-HDL。培养基由于加入了高密度脂蛋白，MSRG转录下降的同时伴有培养基胆固醇、甘油三酯浓度的改变。细胞内糖原、总胆固醇和甘油三酯浓度未发生显著变化。N-HDL及OX-HDL影响HepG2细胞MSRG转录的机制尚需进一步研究。
[Abstract]:In order to study the relationship between metabolic syndrome ( MS ) and atherosclerosis , a rat model with high triglyceride was constructed by a high - sugar diet , which had the basic characteristics of metabolic syndrome . A new gene was found after screening the human liver cDNA library with the differential expression sequence fragment of the rat model liver gene . The gene was not reported at home and abroad . The new gene was temporarily named as a new gene related to metabolic syndrome ( MSRG ) . In order to further understand the relationship between MSRG and MS , the function of MSRG was studied . In this paper , the transcription level of MSRG was studied by designing MSRG , 尾 - actin primer and corresponding Taq man probe . After detection of MSRG transcript level in HepG2 cells , it was found that MSRG was a low transcription gene with respect to 尾 - actin . Results : 鈶

本文编号：1429768