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猪细小病毒分离株感染母猪及胎猪的体内组织分布及病理变化

发布时间:2016-10-18 09:06

  本文关键词:猪细小病毒分离株感染母猪及胎猪的体内组织分布及病理变化,由笔耕文化传播整理发布。


《东北农业大学》 2009年

猪细小病毒分离株感染母猪及胎猪的体内组织分布及病理变化

苗岚飞  

【摘要】: 猪细小病毒病是由猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)感染引起的,本病主要可导致初产母猪的繁殖障碍,表现为流产、死胎及木乃伊胎。PPV作为一种主要的猪病病原严重束缚了养猪业的健康发展。本实验室分离到PPV-BQ株,分子生物学分析证实该毒株与经典强毒株Kresse株同源性较高,同源率达到99.4%;VP2基因及编码蛋白的序列比对结果表明PPV-BQ株与Kresse株编码氨基酸序列完全一致。本次试验选择PPV-BQ株人工感染初孕母猪,试验选用4头11月龄PPV阴性杜洛克初孕母猪,妊娠日龄为35天,随机分为2组,即健康对照组和PPV攻毒组,每组2头。攻毒组于第1天接种PPV-BQ株细胞培养毒10mL(TCID50=107/mL);健康对照组接种RPMI 1640培养液10mL,接种途径为口服加静脉。所有母猪在接种后40天处死,无菌取出母猪体内的胎猪,以及母猪和胎猪的主要脏器。根据PPV NS-1基因设计了一对特异性引物,建立了检测PPV的实时荧光定量PCR方法,对该毒株在感染母猪及其胎猪的体内组织的病毒载量进行测定,进而对病毒的组织分布情况进行分析。采集母猪及其胎猪的主要脏器制成病理切片,HE染色,光学显微镜下观察,对猪体的组织病理学变化进行观测。结果如下: 1.怀孕母猪的剖检结果显示,对照组母猪的各组织无可见的病理损伤,其子宫内胎猪外观形态正常,亦无可见的病理损伤;攻毒组母猪子宫出现肉眼可见的子宫内膜炎症,子宫内胎猪出现木乃伊胎和溶胎现象。 2.病毒组织分布结果显示,对照组母猪及胎猪脏器中均未检出PPV病毒。攻毒组母猪的心脏、脾脏、肺脏、肾脏和子宫中检出PPV病毒,以子宫内病毒含量最高,可达到1012拷贝。攻毒组胎猪仅在心脏、脾脏和肺脏中检出了PPV病毒。 3.组织病理学检测结果显示,对照组母猪及其体内胎猪各脏器均未发现明显的组织病理学损伤;攻毒组母猪的肺脏出现细支气管性肺炎,脾脏出现淋巴细胞减少,心脏、肝脏、肾脏、扁桃体和腹部淋巴结未见明显的组织病理学变化;攻毒组胎猪所检脏器未见明显的组织病理学变化。 本试验证实PPV-BQ株可以感染初孕母猪,通过建立PPV实时荧光定量PCR方法检测了PPV在母猪及胎猪脏器中的病毒载量,对病毒的组织分布情况进行了分析,并对相应脏器进行了病理组织学观察,从器官、分子水平上探讨了PPV-BQ株感染初孕母猪及其胎猪的病毒组织分布和组织病理学变化;为猪细小病毒病的后续研究奠定了理论及实践基础。

【关键词】:
【学位授予单位】:东北农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:S858.28
【目录】:

  • 摘要9-10
  • ABSTRACT10-12
  • 1 引言12-16
  • 1.1 病原学12
  • 1.2 流行病学12-13
  • 1.3 PPV 导致初孕母猪繁殖障碍的研究现状13-15
  • 1.4 PPV 病毒组织分布和组织病理学变化研究概况15
  • 1.5 本研究的目的和意义15-16
  • 2 材料与方法16-24
  • 2.1 主要仪器与材料16
  • 2.1.1 主要仪器16
  • 2.1.2 主要试剂16
  • 2.1.3 试验病毒株及菌种16
  • 2.2 试验动物的分组及处理16-17
  • 2.3 样品的采集与处理17
  • 2.4 检测指标及方法17-24
  • 2.4.1 检测PPV 实时荧光定量PCR 方法的建立17-22
  • 2.4.2 实时荧光定量PCR 检测感染母猪及其胎猪的病毒组织分布22
  • 2.4.3 PPV 感染母猪及其胎猪的组织病理学变化22-24
  • 3 结果与分析24-32
  • 3.1 检测PPV 实时荧光定量PCR 方法的建立24-27
  • 3.1.1 标准品制备24-25
  • 3.1.2 标准曲线的建立25-26
  • 3.1.3 敏感性检测结果26
  • 3.1.4 特异性检测结果26-27
  • 3.1.5 重复性检测结果27
  • 3.2 PPV 感染母猪及其胎猪的病毒组织分布检测结果27-29
  • 3.2.1 感染母猪体内的病毒组织分布27-28
  • 3.2.2 感染胎猪体内的病毒组织分布28-29
  • 3.3 PPV 感染母猪及其胎猪的组织病理学变化检测结果29-32
  • 3.3.1 剖检观察和胎猪情况分析29-30
  • 3.3.2 组织病理学观察结果30-32
  • 4 讨论32-35
  • 4.1 关于PPV 抗原诊断技术的讨论32
  • 4.2 关于动物试验设计的讨论32-33
  • 4.3 关于病毒组织分布的讨论33
  • 4.4 关于病理组织学变化的讨论33-35
  • 5 结论35-36
  • 致谢36-37
  • 参考文献37-46
  • 攻读硕士期间发表的学术论文46
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    3 董冬华;不同铁源及添加水平对母猪和仔猪铁营养状况影响的研究[D];山东农业大学;2014年

    4 刘江坤;不同添加剂和改变母猪思维模式对仔猪生产性能的影响[D];河北农业大学;2013年

    5 苏兴盼;利用公猪精液和外源性激素促进母猪繁育性能的研究[D];东北农业大学;2013年

    6 郭远玉;互助八眉猪不同杂交组合二元母猪的筛选及其利用[D];青海大学;2013年

    7 何浪;湖南2个规模化猪场母猪繁殖水平调查与分析[D];湖南农业大学;2012年

    8 郑家靖;饲用酵母、硒酵母对母猪繁殖性能及仔猪生产性能的影响[D];四川农业大学;2006年

    9 侯成立;猪源益生乳杆菌的分离、筛选及应用研究[D];内蒙古农业大学;2012年

    10 隋超;猪繁殖与呼吸障碍综合征免疫抗体的消长规律[D];山西农业大学;2013年


      本文关键词:猪细小病毒分离株感染母猪及胎猪的体内组织分布及病理变化,由笔耕文化传播整理发布。



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