未成熟树突状细胞诱导大鼠移植免疫耐受的实验研究

发布时间：2018-01-22 13:28

  本文关键词： 未成熟树突状细胞 异位心脏移植 免疫耐受　出处：《青岛大学》2006年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：[目的]研究不同剂量及注射方案下未成熟树突状细胞(immature dendritic cell，，imDC)对大鼠同种异体器官移植免疫耐受的影响，探讨未成熟树突状细胞诱导免疫耐受的机制。 [方法]联合应用低剂量重组大鼠GM-CSF(1.5ng／ml)和IL-4(4ng／ml)诱导Wistar大鼠骨髓细胞，培养出大量未成熟树突状细胞，利用形态学及FCM鉴定其成熟度。将SD大鼠分为4组：第一组为对照组，术前一天尾静脉注射生理盐水0.5ml，第二组为低剂量组，术前1天尾静脉注射imDC 2×10~6，第三组为高剂量组，术前一天注射imDC 2×10~7，第四组为多次注射组，术前7天、术前1天、术后1天、术后5天注射imDC 2×10~6。以Wistar大鼠为供体，SD大鼠为受体，行颈部心脏移植，观察移植心脏存活时间、术后移植后大鼠与供体大鼠及第三品系大鼠单向MLR、心肌病理及血清IL-2、IL-4、IL-10、IFN-r的水平变化。 [结果]1、新分离的细胞呈圆形，胞体小，在培养液中悬浮生长。培养至第3天，可见部分细胞附壁生长，细胞体积增大；在第5天出现毛刺状细胞，但是毛刺短，分支少；至第7天，树突状细胞毛刺状和聚集体仍不明显。FCM示CD80、CD86均为低表达。 2、52例大鼠颈部心脏移植模型，手术成功率83.6％。取心时间(打开胸腔至心脏取出的时间)400.5±32.7秒，血管吻合时间2105.4±115.9秒。无药物干预组，供心存活时间为6.8±1.0天。术中失败11例，其中吻合口出血5例，血栓形成3例，受体呼吸停止2例，供心缺血时间过长1例；术后死亡6例，其中感染4例，不明原因死亡2例。 3、高剂量组移植心脏存活时间与对照组、低剂量组相比较，差别有统计学意义。多次注射组移植心脏存活时间与对照组、低剂量组相比较，差别有统计学意义。低剂量组与对照组移植心脏存活时间相比较，差别有统计学意义。高剂量组与多次注射移植心脏存活时间相比较，差别无统计学意义。 4、供体大鼠脾细胞作为刺激细胞时，高剂量组大鼠脾细胞SI值(3.28)，低剂量组SI值(3.59)，多次注射组SI值(3.71)，均明显低于对照组(6.83)，差异有统计学意义(P＜0.01)，实验组间SI值无明显差异。第三品系Lewis大鼠脾细胞作为刺激细胞时，高剂量组SI值(6.37)，低剂量组SI值(6.67)，多次注射组SI值(6.71)
[Abstract]:Objective To study the effects of immature dendritic cells ( imDC ) on immune tolerance in rat allogeneic organ transplantation under different dosage and injection protocols , and to explore the mechanism of immature dendritic cells to induce immune tolerance . Methods : Rat bone marrow cells were induced with low dose recombinant GM - CSF ( 1.5ng / ml ) and IL - 4 ( 4ng / ml ) . Results : 1 . The newly isolated cells were round , cell bodies were small , and the cells were suspended and grown in the culture medium . On the 3rd day , it was found that the cells were attached to the wall and the volume of the cells increased . On the 5th day , there was a burr - like cell , but the burr was short and the branches were few . On the 7th day , the burr - like and the aggregates of the dendritic cells were still not obvious . 2 銆

本文编号：1454794