大鼠红核脊髓束损伤模型的建立及雌激素对红核神经元保护作用的实验研究

发布时间：2018-02-09 15:46

本文关键词： 红核脊髓束 Fluoro-Ruby 生物素化葡聚糖胺(BDA) 红核脊髓束损伤生物素化葡聚糖胺 Fluoro-Ruby NADPH 红核脊髓束红核雌激素损伤 GFAP NADPH　出处：《南通大学》2007年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】： 第一部分神经示踪技术观察大鼠红核脊髓束的定位目的:观察红核脊髓束的起源及在脊髓中的定位。方法:采用生物素化葡聚糖胺(biotinylated dextran amine, BDA)顺行示踪和Fluoro-Ruby(FR)逆行示踪法。结果:BDA阳性棕黄色的红核脊髓束主要起于红核的大细胞,离开红核后立即经中脑中缝的腹侧被盖交叉至对侧,形成红核脊髓束,行于脊髓白质外侧索的背侧、脊髓灰质后角的外侧,密集排列成独立的纤维束,下行可达颈、腰部的膨大。FR阳性反应产物在颈段脊髓外侧索的背侧定位,逆行至中脑红核中,红核中可见到大量红色阳性标记细胞。结论:运用BDA顺行神经示踪剂和FR逆行荧光示踪剂可以清晰对正常大鼠红核脊髓束进行精确解剖定位,为进一步研究红核脊髓束的损伤和功能重建提供形态学基础。第二部分大鼠红核脊髓束损伤模型的建立与评价目的:成功制作大鼠单侧红核脊髓束损伤模型。方法:选择性切割大鼠颈段红核脊髓束,建立大鼠单侧红核脊髓束损伤模型,采用前肢支撑探测实验进行行为学检测,运用生物素化葡聚糖胺(BDA)顺行神经示踪法,Fluoro-Ruby逆行荧光标记神经示踪法和NADPH-d组织化学法对模型进行形态学评判。结果:红核脊髓束损伤组大鼠术后左侧前肢伸肌瘫痪,前肢选择支撑实验显示其伸肌功能受限; BDA神经示踪法结果显示在颈段平面,仅见一束BDA阳性反应产物在右侧走行,在脊髓侧索的背侧半下行至腰段,而在损伤平面以下,损伤侧未见BDA阳性反应产物在脊髓外侧索中走行。Fluoro-Ruby逆行荧光标记神经法结果发现术后4w右侧中脑红核标记神经元内的神经元细胞数量和形态未见有改变,而在8w出现数量明显减少,并可见到红核内细胞出现变性、萎缩。NADPH组织化学染色可见到红核脊髓束损伤侧的脊髓外侧索出现较多深蓝色的阳性标记细胞,并有较多深染阳性突起。结论:选择在颈髓切断一侧红核脊髓束,损伤区和红核内NOS含量增高,红核神经元显著减少,表明红核神经元发生了逆行性损伤,是研究红核脊髓束的可塑性和神经轴突再生的理想动物模型。BDA神经束路示踪法和FR逆行荧光示踪法可作为红核脊髓束损伤模型的形态学指标。第三部分雌激素对去卵巢大鼠脊髓损伤后红核神经元保护作用的实验研究目的:研究雌激素E2对去卵巢雌性大鼠脊髓损伤后逆行性红核神经损伤的保护作用和促进肢体功能恢复的作用。方法:将大鼠分为红核脊髓束损伤组、E2治疗组、雌激素受体拮抗剂(ICI 182,780)组、E2+ICI组、正常组。切断SD大鼠脊髓C3-C4背外侧索制作红核脊髓束半横断损伤模型,并在损伤区分别放置吸附有E2、E2+ICI、ICI的明胶海绵;术后应用前肢支撑探测实验,BDA顺行示踪法, FR逆行神经示踪技术,NADPH组织化学与GFAP免疫蛋白印迹法,观察雌激素对去卵巢雌性大鼠脊髓损伤后对红核神经元的影响。结果:E2组行为功能评分与红核脊髓束损伤组及E2+ICI、ICI组没有明显差异。FR标记的损伤侧红核神经元数,E2组明显多于损伤组(p 0.05)。E2组脊髓损伤侧产生的反应性NOS少于红核脊髓束损伤组及E2+ICI、ICI组(p 0.05),中脑红核部位反应性NOS与损伤组没有明显的区别。脊髓内GFAP表达量,E2组显著低于红核脊髓束损伤组及E2+ICI、ICI组(p 0.05)。结论:雌激素可减轻红核脊髓束损伤后的继发损伤,而对运动神经元发挥保护作用,从而对肢体功能的恢复起到促进作用。
[Abstract]:Observation of the localization of the red nucleus of the red nucleus in rats by the first part of nerve tracer technique Objective : To observe the origin and localization of red nucleus in the spinal cord . Establishment and evaluation of the damage model of the second part of the rat red nucleus spinal cord injury model Objective : To study the damage model of unilateral red nucleus in rats . Experimental study on the protective effect of the third partial estrogen on the protective effect of red nucleus neurons after spinal cord injury in ovariectomized rats Objective : To study the protective effect of estrogen E2 on retrograde erythroid nerve injury after spinal cord injury in ovariectomized female rats and to promote the restoration of limb function . Methods : The rats were divided into three groups : red nucleus spinal cord injury group , E2 treatment group , estrogen receptor antagonist ( ICI 182,780 ) , E2 + ICI group and normal group . There was no significant difference between the response NOS in the spinal cord injury group and the group of E2 + ICI and ICI ( p 0.05 ) . The expression of GFAP in the spinal cord was significantly lower than that of the red nucleus and the group of E2 + ICI and ICI ( p 0.05 ) . Conclusion : The estrogen can reduce secondary injury after spinal cord injury , and play a role in protecting the motor neuron , thus promoting the restoration of limb function .

【学位授予单位】：南通大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：R651.2;R-332;R96

【参考文献】