不同IL-15基因转染对NCI-H446细胞免疫生物学特性的影响

发布时间：2018-02-16 05:43

本文关键词： IL-15基因基因转染 NCI-H446细胞 HLA分子 NK CD8+CTL MICA IFN-γ　出处：《河北医科大学》2006年博士论文　论文类型：学位论文

【摘要】： 目的:肿瘤是严重威胁人类生命健康的重大疾病,免疫功能与肿瘤的发生发展密切相关。随着对肿瘤发生、发展和治疗的研究,尤其是细胞与分子水平的研究逐步深入,转染抗瘤相关细胞因子基因,已成为探索肿瘤免疫的新热点。肿瘤免疫主要是细胞免疫,CD8~+细胞毒T细胞(CD8~+CTL)和NK细胞是细胞免疫的主体抗瘤细胞。IL-15是1994年发现,与IL-2有许多重叠生物活性的细胞因子;是能显著提高CD8~+CTL细胞和NK细胞增殖和杀瘤活性,而备受关注的抗瘤细胞因子。虽然已有一些关于IL-15基因转染肿瘤细胞对其在动物体内成瘤影响的报道,但原型IL-15基因转染的研究未达到预期的抗瘤效果,曾怀疑是其长信号肽影响分泌所致;转染促其分泌信号肽的改型IL-15基因研究也未达到预期结果。由于已知:CD8~+CTL杀瘤识别的抗原,需要肿瘤细胞表面的HLA I类分子提呈;CD8~+CTL的杀瘤功能活化,需要肿瘤细胞表面HLA II类分子提呈抗原激活的CD4~+Th细胞辅助;NK细胞杀瘤,需要肿瘤细胞对其杀伤敏感;肿瘤细胞表达NK细胞活化性受体NKG2D的配体MICA,可活化NK细胞对肿瘤细胞的杀伤;IFN-γ能活化CD8~+CTL细胞和NK细胞,并能促进HLA I类和II类分子表达。为此,本研究在已成功构建三种不同IL-15基因转染NCI-H446细胞(TC)模型基础上,研究不同IL-15基因转染,对NCI-H446细胞的HLA I类和II类分子及MICA基因表达、NK杀伤敏感性、诱导T细胞杀瘤和IFN-γ分泌的影响,从基因转染对肿瘤细胞免疫生物学特性改变的角度,揭示其肿瘤免疫的意义,为IL-15基因转染的抗瘤研究提供新的实验和理论依据。方法: 1以野生株NCI-H446细胞(WC)为对照,分别检测不同IL-15基因转染对NCI-H446细胞的HLA I类和II类分子表达(直接免疫荧光FCM法)及对NK杀伤敏感性(MTT法)的影响。 2在有或无实验选定无独立诱导PBMC增殖作用剂量IL-2存在下,分别
[Abstract]:Objective : To study the effect of IL - 15 gene transfection on tumor cells and to investigate the effect of IL - 15 gene transfection on tumor cells . 1 The effect of different IL - 15 gene transfection on HLA class I and type II molecule expression ( direct immunofluorescence flow cytometry ) and NK cytotoxicity ( MTT method ) in NCI - H446 cells were detected with wild strain NCI - H446 cells ( WC ) . 2 in the presence or absence of an independent induction PBMC proliferation action dose of IL - 2 ,

【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2006
【分类号】：R392

【参考文献】