抗人可溶性间皮素相关蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定
本文选题：间皮素 切入点：可溶性间皮素相关蛋白 出处：《细胞与分子免疫学杂志》2007年03期 论文类型：期刊论文
【摘要】：目的:制备鼠抗人可溶性间皮素相关蛋白(SMR)的单克隆抗体(mAb),鉴定其生物学特性。方法:应用计算机通过综合预测对间皮素(MSLN)进行B-细胞表位预测。合成相应肽段并免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备mAb,利用免疫细胞化学和Western blot分析对所制备的mAb进行鉴定。结果:综合预测方法分析间皮素的抗原表位可能于153-162、282-292及471-481氨基酸残基或其附近,选择性合成了可能性最高的位于471-481氨基酸残基的可溶性间皮素相关蛋白表位,制备了mAb(2H10),经免疫细胞化学和Western blot分析该抗体具有较高的特异性。结论:成功地制备了鼠抗人可溶性间皮素相关蛋白的mAb(2H10),该抗体具有较高的特异性,为进一步利用ELISA对可溶性间皮素相关蛋白进行检测奠定了基础。
[Abstract]:Objective: to prepare a monoclonal antibody against human soluble mesothelin-associated protein (SMRs), and to identify its biological characteristics. Methods: B- cell epitopes were predicted by computer, the corresponding peptides were synthesized and BALB/c mice were immunized. MAbs were prepared by hybridoma technique and identified by immunocytochemistry and Western blot analysis. Results: the antigenic epitopes of mesothelin may be located at or near the amino acid residues of 153-162n282-292 and 471-481. Soluble mesothelin-associated protein epitopes located at 471-481 amino acid residues were selectively synthesized. MAb2H10 was prepared, and the antibody was characterized by immunocytochemistry and Western blot. Conclusion: the mAb2H10G antibody against human soluble mesothelin-associated protein has been successfully prepared, and the antibody has high specificity. The results laid a foundation for the further detection of soluble mesothelin-associated proteins by ELISA.
【作者单位】： 河北医科大学第四医院妇产科 河北医科大学第四医院妇产科 河北医科大学第四医院妇产科 河北医科大学第四医院科研中心 白求恩国际和平医院 河北医科大学第四医院妇产科 河北医科大学第四医院妇产科
【基金】：国家自然科学基金资助项目(30572093) 河北省自然科学基金资助项目(C2005000804)
【分类号】：R392.11
【参考文献】
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，本文编号：1558363
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