内含肽介导的鼠多瘤病毒样颗粒生产表达和纯化

发布时间：2018-03-12 08:09

  本文选题：鼠多瘤病毒　切入点：病毒样颗粒　出处：《天津大学学报(自然科学与工程技术版)》2014年04期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：鼠多瘤病毒样颗粒(VLPs)可由结构蛋白VP1自组装而成,可用于疫苗开发、基因治疗、药物传递和生物材料等方面.针对目前VP1生产中需要凝血酶去除谷胱甘肽S-转移酶(GST)标签,生产成本较高、操作复杂的问题,利用内含肽(intein)自剪切的特征,将内含肽插入到VP1与GST标签之间进行融合表达,表达产物经亲和色谱纯化,并通过改变柱内pH值、温度诱导内含肽剪切,使VP1与GST-intein分离从而获得VP1蛋白,产量为4,mg/(L培养基).纯化的VP1可自组装成与天然鼠多瘤病毒样颗粒一致的VLPs.结果表明,内含肽介导鼠多瘤病毒样颗粒生产纯化流程简单易行,且无需凝血酶参与,大幅降低成本,为VLPs的高效制备奠定了基础.
[Abstract]:Murine polytumor-like virus (MPV) particles can be self-assembled from structural protein VP1 and can be used in vaccine development, gene therapy, drug delivery and biomaterials, etc. In view of the need for thrombin to remove glutathione S-transferase (GST) label in VP1 production at present, In order to solve the problem of high production cost and complex operation, the peptide was inserted into the VP1 and GST label for fusion expression. The product was purified by affinity chromatography, and the pH value in the column was changed by changing the pH value in the column. VP1 protein was isolated from GST-intein by temperature-induced peptide shearing. The yield of VP1 protein was 4 mg / L. The purified VP1 could self-assemble into VLPslike particles of natural murine polytumour virus. The purification process of murine polytumour virus-like particles mediated by peptide was simple and without thrombin participation, which greatly reduced the cost, which laid a foundation for the efficient preparation of VLPs.
【作者单位】： 天津大学化工学院;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(21236005,21006069) 国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(2012AA020206) 天津市应用基础及前沿技术研究计划重点资助项目(13JCZDJC31100) 天津市国际科技合作项目(11ZCGHHZ00600) 天津大学自主创新基金资助项目
【分类号】：R392;Q939.4

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：1600699