白色念珠菌经组织蛋白酶B途径诱导小鼠腹腔巨噬细胞NLRP3炎性体表达
本文选题:白色念珠菌 + 含热蛋白结构域富含亮氨酸重复序列的核苷酸结合寡聚化结构域 ; 参考:《新乡医学院学报》2014年01期
【摘要】:目的探讨含热蛋白结构域3富含亮氨酸重复序列的核苷酸结合寡聚化结构域(NLRP3)在白色念珠菌诱导的小鼠腹腔巨噬细胞促炎性细胞因子产生中的作用及其激活途径。方法体外培养小鼠腹腔巨噬细胞,将其分为空白对照组、CA-074Me组、白色念珠菌组、白色念珠菌+10-6mol·L-1CA-074Me组和白色念珠菌+10-5mol·L-1CA-074Me组。实时荧光定量聚合酶链反应检测细胞内NLRP3 mRNA表达,Western blot检测细胞内溶酶体组织蛋白酶B(cathepsin B)和胱天蛋白酶-1(caspase-1)p20蛋白质水平,酶联免疫吸附试验测定各组细胞培养上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)水平。结果白色念珠菌组细胞内NLRP3 mRNA表达、cathepsin B和caspase-1 p20蛋白表达、细胞培养上清液中IL-1β水平均显著高于空白对照组(P0.01)。加入10-5mol·L-1CA-074Me干预后,细胞内NLRP3mRNA表达、cathepsin B和caspase-1 p20蛋白的表达及细胞培养上清液中IL-1β水平与白色念珠菌组比较显著降低,差异有统计学意义(P0.01)。结论白色念珠菌通过活化cathepsin B诱导巨噬细胞NLRP3的表达、caspase-1的活化和IL-1β的分泌。
[Abstract]:Objective to investigate the role of nucleotide binding oligodeoxynucleotides (NLRP3) containing leucine-rich repeats in the production of inflammatory cytokines in mouse peritoneal macrophages induced by Candida albicans. Methods Murine peritoneal macrophages were cultured in vitro and divided into control group (CA-074 me group), Candida albicans group (10-6mol L-1CA-074Me group) and Candida albicans group (10-5mol L-1CA-074Me group). The expression of NLRP3 mRNA in cells was detected by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction. The levels of intracellular lysosomal cathepsin B (B(cathepsin B) and cystatin 1 (caspase-1) p20 protein were detected by Western blot. Enzyme linked immunosorbent assay (Elisa) was used to determine the level of interleukin-1 尾-1-1 尾 in the supernatant of cell culture in each group. Results the expression of cathepsin B and caspase-1 p20 protein in the cells of Candida albicans group was significantly higher than that in the control group. The level of IL-1 尾 in the supernatant of cell culture was significantly higher than that in the control group. The expression of cathepsin B and caspase-1 p20 protein in cell culture supernatant and the level of IL-1 尾 in cell culture supernatant were significantly lower than those in Candida albicans group after the intervention of 10-5mol L-1CA-074Me. The difference was statistically significant (P 0.01). Conclusion Candida albicans activated cathepsin B to induce the activation of NLRP3 and the secretion of IL-1 尾 in macrophages.
【作者单位】: 武汉市第一医院皮肤科;华中科技大学同济医学院附属协和医院皮肤科;
【基金】:国家自然科学基金资助项目(编号:81101201,81171495,81271765)
【分类号】:R379
【参考文献】
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