HSP70抑制LPS所致细胞因子表达的分子机制研究

发布时间：2018-05-04 02:26

  本文选题：LPS + 细胞因子　； 参考：《中南大学》2006年博士论文

【摘要】：本研究从调控炎症介质基因表达的细胞内信号转导通路，探讨热休克反应(heat shock response，HSR)以及HSP70抑制LPS所致细胞因子表达的机制。 经采用RT-PCR、ELISA检测发现，大肠杆菌脂多糖(LPS)可诱导RAW264.7小鼠巨噬细胞产生大量TNF-α，IL-1β和IL-15等细胞因子。当细胞经受热休克反应(42.5℃1h，恢复12h)后再进行LPS刺激，，则LPS诱导的细胞因子表达受到抑制。在此基础上采用过表达HSP70的RAW264.7细胞进行实验，发现HSP70同样抑制了LPS诱导的细胞因子表达。 鉴于细胞内信号转导通路在调控炎症介质基因表达中的作用，本实验采用磷酸化抗体检测MAPK信号通路的活化，分析了HSR以及HSP70对LPS所致MAPK信号通路活化的影响。Western blot结果显示，HSR以及HSP70自身均不影响MAPK的活化(磷酸化)。在LPS刺激30min后，HSR组以及HSP70过表达组中的JNK、ERK、p38的活化(磷酸化)程度与非HSR正常细胞组或转空载体细胞组比较均无明显区别。EMSA结果显示，HSR以及HSP70不影响LPS刺激所致的MAPK下游转录因子AP-1的DNA结合活性。据此我们认为，HSR以及HSP70不影响LPS所致的MAPK信号通路活化，其抑制LPS所致细胞因子表达的机制可能涉及其他因素。 由于NF-κB／IκB信号转导通路的活化在LPS所致炎症反应的发生中具有重要作用，我们进一步分析了HSP70过表达对LPS所致NF-κB信号通路活化的影响。通过免疫荧光、免疫细胞化学及Western blot
[Abstract]:The aim of this study was to investigate the mechanism of heat shock response to heat shock response (HSRs) and the inhibitory effect of HSP70 on the expression of cytokines induced by LPS by regulating the intracellular signal transduction pathway of inflammatory mediators gene expression. Elisa assay showed that Escherichia coli lipopolysaccharide (LPS) could induce the production of a large number of cytokines such as TNF- 伪, IL-1 尾 and IL-15 in macrophages of RAW264.7 mice. The expression of cytokines induced by LPS was inhibited when the cells were stimulated by LPS after heat shock reaction at 42.5 鈩

本文编号：1841177