MPTP损伤的小鼠慢性PD模型的制作与评价

发布时间：2018-05-21 00:35

  本文选题：帕金森病(PD) + MPTP　； 参考：《电子科技大学》2007年硕士论文

【摘要】： 帕金森病(Parkinson’s disease,PD)主要是由中脑黑质的多巴胺神经元发生退行性坏死而引起的。直到目前,临床上还没有发现一种可以彻底阻止多巴胺神经元发生退行性变化的有效治疗手段。其中最主要的原因就是我们对于引发这种退行性变化的一系列分子机制还没有充分地了解。为了系统地研究PD中多巴胺神经元发生退行性变化的分子机制,就需要建立一个接近临床的、重复性好的、可控性强的PD动物模型。 本研究以C57BL/6小鼠为实验动物,通过腹腔注射神经毒素1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)来制作慢性PD模型。实验期间的主要的模型评价手段有: 1.行为学检测。在注射的不同时期,用开野实验观察小鼠的自发行为,以及用平衡木和旋转杆等装置考察了小鼠的运动平衡能力。 2.组织病理学检查。运用一系列组织化学方法如MTT检验,酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)免疫组织化学方法和尼氏(Nissl)染色法考察了小鼠黑质多巴胺神经元的损伤程度。 3.神经生化检验。利用高效液相色谱—电化学法(HPLC-EC)测定纹状体(Striatum)的多巴胺(Dopamine,DA)水平,以考察造模小鼠与正常小鼠相比较情况下,黑质多巴胺能神经元向输送到纹状体的多巴胺的减少程度。 结果: 1.注射MPTP后10-15min,小鼠会出现震颤、竖尾、竖毛、运动迟缓、步态不稳、肢体僵硬,活动明显减少等现象。旋转杆测试(rotarod)结果显示,对照组和处理组在运动平衡能力上有显著性差异(P0.05)。 2.造模组和对照组在MTT检验和Nissl染色两项检测中并未体现显著性差异(P0.05)。但是PD模型的典型病理检测指标——TH免疫组化结果显示,模型组SNc区域的TH阳性神经元的数量明显少于对照组(P0.05)。 3.HPLC检测结果显示,模型组的纹状体DA含量低于对照组,且二者有显著性差异(P0.05)。 结论: 本实验所采用的慢性PD模型制作方法是可行的。造模小鼠能够从行为学,组织病理学和神经生化等方面模拟PD的一些典型特征,如典型的行为学变化,多巴胺神经元的渐进性死亡等。因此可用于下一步进行PD病理的分子机制的探索研究。
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本文编号：1916957