日本血吸虫重组IAP蛋白的免疫保护效果评估

发布时间：2018-05-25 10:27

  本文选题：日本血吸虫 + 凋亡蛋白抑制因子　； 参考：《中国动物传染病学报》2014年03期

【摘要】：为研究日本血吸虫凋亡蛋白抑制因子(inhibitor of apoptosis protein of Schistosoma japonicum,SjIAP)重组蛋白诱导BALB/c小鼠的免疫保护效果,利用PCR技术扩增SjIAP基因,构建重组表达质粒pET-28a(+)-SjIAP,诱导表达重组SjIAP蛋白,并利用重组蛋白制备兔源多克隆抗体血清。然后,选用SjIAP重组蛋白免疫BALB/c小鼠,利用ELISA检测免疫小鼠血清中的特异性抗体水平,以及免疫小鼠脾脏淋巴细胞在SjIAP重组蛋白刺激后产生的细胞因子水平。强化免疫后,将小鼠进行血吸虫尾蚴攻虫试验,感染38 d,进行剖杀,计算虫体减虫率及肝脏减卵率。Western blot结果表明本研究制备的兔源多抗血清能特异性识别SjIAP重组蛋白。ELISA检测表明免疫SjIAP重组蛋白可诱导较高水平的IgG及IgG亚型(IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3)抗体和IFN-γ、IL-2及IL-4细胞因子。动物试验表明,免疫SjIAP重组蛋白的小鼠与PBS组相比分别获得了31.5%的减虫率和37.2%的肝脏减卵率。免疫SjIAP重组蛋白能诱导小鼠获得一定减虫和减卵保护效果,提示血吸虫凋亡蛋白抑制因子可作为抗血吸虫病的疫苗候选分子。
[Abstract]:In order to study the immune protection of Schistosoma japonicum inhibitor of apoptosis protein of Schistosoma japonicum SjIAPs recombinant protein on BALB/c mice, the SjIAP gene was amplified by PCR technique, and the recombinant expression plasmid pET-28a (pET-28a) was constructed to induce the expression of recombinant SjIAP protein. Rabbit polyclonal antibody serum was prepared by recombinant protein. Then, BALB/c mice were immunized with SjIAP recombinant protein. The specific antibody levels in serum and cytokines produced by splenic lymphocytes stimulated by SjIAP recombinant protein were detected by ELISA in immunized mice. The mice were infected with Schistosoma cercariae for 38 days. The results of calculating worm reduction rate and liver oocyte reduction rate. Western blot showed that the rabbit polyantiserum prepared in this study could specifically recognize SjIAP recombinant protein. Elisa test showed that immunized SjIAP recombinant protein could induce higher level of IgG and IgG subtype IgG1 / IgG2bG3 antibody. And IL-2 and IL-4 cytokines. Compared with PBS group, 31.5% worm reduction rate and 37.2% liver egg reduction rate were obtained in mice immunized with SjIAP recombinant protein. Immune SjIAP recombinant protein could induce mice to obtain some protective effects of worm reduction and egg reduction, suggesting that the inhibitor of apoptosis protein of Schistosoma japonicum could be used as a vaccine candidate for schistosomiasis.
【作者单位】： 中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室;
【基金】：国家自然科学基金(30901068)
【分类号】：R392

【共引文献】

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本文编号：1933099