肌酐、尿酸干化学检测试纸条的临床应用研究

发布时间：2016-11-30 14:10

  本文关键词：IgA肾病患者体质、黏膜炎症、中医证型及临床病理相关性研究，由笔耕文化传播整理发布。

《中南大学》 2014年

肌酐、尿酸干化学检测试纸条的临床应用研究

成平  

【摘要】：目的 在原肌酐、尿酸酶法试剂盒中添加新色原物质TBHBA,提高肌酐、尿酸酶学检测方法的灵敏度,在其理论基础支持下研究出一种具有自主知识产权的,高度灵敏的、快速检测肌酐、尿酸干化学试纸条,为临床监测肾功能水平,尤其是对家庭监测慢性肾病(CKD)患者肾功能的变化和终末期肾病(ESRD)患者透析效果的判断提供一种简便、快捷定量/半定量的可靠的检测手段。 方法 1.建立高灵敏度新色原酶学检测方法：选择高纯度的新色原2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸(TBHBA)添加到肌酐、尿酸检测试剂盒的R1试剂中,混匀后作为新色原试剂。通过全波段扫描检测新色原试剂的最佳比色波长；根据浓度-吸光度曲线选择TBHBA的最佳浓度；通过对比试验确定新方法试剂比例和最佳样品量；采用最佳检测参数,评估新色原检测方法的的各项性能,确定TBHBA对提高检测灵敏度的可行性提供依据。 2.试纸条的制作：首先微孔反应板上进行大量湿化学试验,探索纸片反应体系的最佳条件参数；配制滤纸浸渍液,手工制作肌酐、尿酸酶促检测试纸条。 3.标准比色卡的制作：在微孔反应板上进行湿化学实验,根据一系列样本标准液反应后的颜色深浅梯度,制作试纸条结果判读的标准比色卡。 4.试纸条的评价：检测已知浓度的标准品和临床血清标本,对比全自动分析仪测定的肌酐、尿酸浓度,分析自制试纸条检测结果的精准性,评价自制肌酐、尿酸试纸条的临床应用价值。 结果 1.高灵敏度肌酐、尿酸检测新方法的参数分别为：检测波长为520nm、510nm, TBHBA浓度为3g/L、5g/L,最大样本添加量为20μL15μL,最佳试剂比例为3：1、4：1。 2.肌酐、尿酸酶学新方法线性回归方程分别为y=0.0006x+0.0165、y=0.0009x-0.0209。线性范围分别为12.5μmol/L～1000μmol/L、40μmol/L～1600μmol/L,该范围涵盖了正常人和肾病患者的肌酐、尿酸水平,满足临床检测需要。新方法检测反应显色能稳定2小时,肌酐和尿酸高、低值标准品的CV值分别是2.02%、4.13%和3.25%、2.86%。新色原试剂4℃能保存2个月。新色原方法与原试剂盒比较,灵敏度分别是原方法的2倍和1.5倍。 3.研发制作了肌酐、尿酸检测试纸条和标准比色卡；试纸条制作过程中浸渍时间为10秒,试纸条检测样本量为15μL,检测结果最佳终点观察时间为20～30min；临床血清标本检测,试纸条检测分组的血清样本生化检测,浓度均值和中位数均在试纸条设置的理论区间内,自制试纸条半定量结果与全自动生化仪测定浓度基本符合。 结论 1.选择以TBHBA为色原能有效提高肌酐、尿酸酶学检测方法的灵敏度,为肌酐、尿酸干化学检测试纸条的研究提供可靠依据。 2.肌酐、尿酸干化学检测试纸条测定结果准确、可靠,重复性好,可半定量/定量检测到肌酐、尿酸低浓度水平的样本,理论上支持唾液样本肌酐、尿酸的检测。 3.肌酐、尿酸干化学检测试纸条携带方便、检测快捷,为临床监测肾功能水平、尤其是家庭CKD患者的肾功能监测和ESRD透析效果的判断具有重要临床意义。 4.自主研发的肌酐、尿酸酶促干化学检测试纸条有较好的应用前景和市场开发价值。

【关键词】：
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R446.1;R692
【目录】：

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