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重组CHO细胞无血清培养基的研制

发布时间:2018-06-09 21:02

  本文选题:CHO细胞 + 无血清培养 ; 参考:《中国生物制品学杂志》2014年07期


【摘要】:目的研制适合于重组CHO细胞生长的低成本无血清培养基。方法以无血清培养基SFM为基础,分别向其中加入不同的组分,包括水解物(0.8%大豆蛋白水解物、0.8%超滤植物蛋白栋、0.8%酵母提取物、0.8%谷类水解物、0.4%大豆蛋白水解物+0.4%酵母提取物)、激素(10μmol/L的地塞米松、氢化可的松)、脂类物质(0.05%脂肪乳剂、50 mg/L氯化胆碱、10 mmol/L磷脂酰胆碱),培养CHOK1细胞(表达重组人肿瘤坏死因子受体-Fc融合蛋白),检测不同添加物质对细胞密度、活力、蛋白表达量及蛋白中聚体含量的影响。结果添加大豆蛋白水解物和酵母提取物的混合物、地塞米松及脂肪乳剂可增加细胞密度,提高细胞活力,增加目的蛋白的表达量,降低蛋白中的聚体含量。结论通过对几种关键组分的优化,研制出适合于重组CHO细胞生长的低成本无血清培养基。
[Abstract]:Objective to develop a low cost serum-free medium for the growth of recombinant Cho cells. Methods on the basis of serum-free medium SFM, different components were added to SFM. Including 0.8% soybean protein hydrolysate, 0.8% ultrafiltration plant protein extract, 0.8% yeast extract, 0.8% cereal hydrolysate, 0.4% soybean protein hydrolysate, 0.4% yeast extract, and 10 渭 mol / L dexamethasone, Hydrocortisone, 0.05% lipid emulsion, 50 mg / L choline chloride 10 mmol / L phosphatidylcholine, cultured CHOK1 cells (expressed recombinant human tumor necrosis factor receptor -FC fusion protein), detected the cell density and activity of different additives. The effect of protein expression and polymer content in protein. Results adding the mixture of soybean protein hydrolysate and yeast extract, dexamethasone and fat emulsion could increase cell density, increase cell viability, increase the expression of target protein, and decrease the content of polymer in protein. Conclusion A low cost serum-free medium suitable for the growth of recombinant Cho cells was developed by optimizing several key components.
【作者单位】: 鲁南制药集团股份有限公司;
【分类号】:R392

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