SHIV-XJ02170病毒感染中国恒河猴的实验研究

发布时间：2018-09-02 06:59

【摘要】：SHIV病毒艾滋病动物模型是目前国外艾滋病模型研究的趋势，被认为是比现阶段普遍应用的SIV模型针对性更强、更有意义的动物模型。为了尽早开展国内此项研究，，尤其是选定毒力较强的SHIV毒株，成功建立SHIV感染动物模型，在前期SIV／SAIDS模型研究的基础上，本研究以SHIV-XJ02170病毒(以SIVmac239病毒基因组和C型HIV-1病毒的env基因为主体构建的一株SHIV病毒)及前病毒质粒接种中国恒河猴，进行了包括临床表现、病毒学、免疫学等方面研究。为了更准确定量测定实验恒河猴病毒感染状态，建立了测定SIV／SHIV病毒RNA载量的SYBR Green Ⅰ荧光染料实时定量RT-PCR方法和测定SIV／SHIV前病毒DNA的SYBR Green Ⅰ实时定量PCR方法。同时为了进一步增强SHIV-XJ02170病毒的毒力，对其进行中国恒河猴体内传代，以期获得一株高毒力、高致病性的SHIV病毒。 本研究共选用了13只中国恒河猴，实验前经血清学和PCR证明无SIV，STLV-1，SRV／D和B病毒感染。实验在生物安全三级实验室中进行。第一代实验猴共4只，分两组。第一组2只经肌肉注射SHIV-XJ02170前病毒质粒DNA；第二组两只静脉注射SHIV-XJ02170病毒液。当第一代实验猴检出病毒达高峰期后，取10mL感染猴的全血，抗凝后静脉接种第二代4只实验猴。第二代实验猴检出病毒后再将其全血静脉接种第三代3只实验猴，连续传至第4代2只猴。每代实验猴均定期采集肝素和EDTA抗凝血液标本，分别进行病毒分离、PCR方法检测感染猴PBMC中前病毒DNA、RT-PCR方法检测血浆病毒RNA、CD4~+／CD8~+、血浆P27抗原等指标的测定，以监测SHIV-XJ02170病毒在恒河猴体内复制和传代情况。实验结果显示原代SHIV-XJ02170病毒和前病毒质粒均可感染中国恒河猴，但传代的实验猴病毒检出率降低，病毒血症持续时间明显缩短，且全部13只实验猴都未产生典型的艾滋病症状，只有二代猴A0408
[Abstract]:SHIV HIV / AIDS animal model is the trend of AIDS model research abroad. It is considered to be a more targeted and meaningful animal model than the SIV model which is widely used at present. In order to carry out this domestic study as soon as possible, especially to select the virulent SHIV strain, the animal model of SHIV infection was established successfully. Based on the previous study of SIV/SAIDS model, In this study, the Chinese rhesus monkey was inoculated with SHIV-XJ02170 virus (a SHIV virus constructed from the genome of SIVmac239 virus and the env gene of type C HIV-1 virus) and its provirus plasmid, including clinical manifestations, virology, immunology and so on. In order to determine the infection status of rhesus monkey virus more accurately, the SYBR Green 鈪

本文编号：2218620