大容量天然人源Fab抗体库的构建及日本血吸虫抗独特型抗体的筛

发布时间：2018-09-19 07:30

【摘要】：目的:构建大容量天然人源Fab抗体库,筛选全人源日本血吸虫抗独特型抗体并进行初步鉴定。方法:采集15位健康成人的骨髓淋巴细胞,构建天然人源Fab抗体库。并以日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)及成虫抗原(SWAP)免疫鼠血清IgG包板进行筛选,经ELISA鉴定后,对阳性克隆进行可溶性表达。结果:构建了2×109大容量天然人源Fab抗体库,经核苷酸序列分析,证实插入片段为Fab基因片断。经过6轮筛选后,从富集的次级抗体库中随机挑取80个克隆,用ELISA法鉴定得到4个可与免疫鼠血清(Ab1)特异性结合,而不与SEA及SWAP结合的单克隆抗体(C12、C19、D1、D2),其中C12经SDS-PAG
[Abstract]:Aim: to construct a large volume natural human Fab antibody library and to screen human anti idiotypic antibodies against Schistosoma japonicum. Methods: bone marrow lymphocytes from 15 healthy adults were collected and the natural human Fab antibody library was constructed. The serum IgG envelopes of mice immunized with Schistosoma japonicum soluble egg antigen (SEA) and adult worm antigen (SWAP) were screened and identified by ELISA, and the positive clones were expressed in a soluble way. Results: the 2 脳 10 ~ 9 large capacity natural human Fab antibody library was constructed. The nucleotide sequence analysis showed that the inserted fragment was a Fab gene fragment. After six rounds of screening, 80 clones were randomly selected from the enriched secondary antibody library, and four monoclonal antibodies (C12C19D1D _ 2), which could specifically bind to immunized mouse serum (Ab1), but not to SEA and SWAP, were obtained by ELISA assay, of which C12 was identified by SDS-PAG.
【作者单位】： 南京医科大学病理学系 南京医科大学病理学系 南京医科大学病理学系 南京医科大学病理学系 南京医科大学病理学系
【基金】：国家“863”项目资助(2002AA214181)
【分类号】：R392

【参考文献】

相关硕士学位论文 前1条

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【共引文献】

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本文编号：2249448