大鼠脑淋巴引流阻滞顶叶皮层炎症反应的实验研究

发布时间：2018-11-12 20:28

【摘要】：目的：通过观察大鼠脑淋巴引流阻滞后脑组织的病理变化,顶叶皮层肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-alpha, TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1 beta, IL-1β)的表达及白细胞的浸润,明确大鼠脑淋巴引流阻滞后脑内炎症反应的存在,并对其在淋巴阻滞性脑损伤中的作用进行初步探讨。方法：健康雄性Wistar大鼠156只,随机分为正常组(n=12)、手术组(12h、1d、3d、5d、7d、14d,n=12)、假手术组(12h、1d、3d、5d、7d、14d,n=12)；正常组不做任何处理,手术组采用手术分离、摘除颈部深、浅及下颌淋巴结,结扎输入输出淋巴管,假手术组仅手术分离淋巴结而不摘除,亦不结扎淋巴管。取不同时间点大鼠脑组织,HE染色观察大鼠顶叶皮层形态结构的变化,尼氏染色评价皮层神经元的损伤程度,用髓过氧化物酶(MPO)法定量检测皮层中性粒细胞的浸润,免疫组织化学方法观察白细胞(CD45标记)浸润的变化,顶叶皮层细胞因子TNF-α、IL-1β及胞间粘附分子(intercellular adhesion molecule-1, ICAM-1)表达的动态变化,并对染色结果进行半定量分析及相关性分析。结果： 1手术组大鼠1天出现脑组织疏松,白细胞浸润,尼氏体染色浅淡,有缺失,部分神经细胞肿胀,核溶解,神经元数量减少,周围有空泡形成,上述变化5天时最明显,7天时尼氏体着色加深及含量增加,14天时恢复至正常水平。假手术组和正常组大鼠无明显病理变化。 2手术组大脑皮层MPO活性12h开始升高,3天达高峰(与正常组及假手术组比较p0.01),5天时开始下降,第7天恢复正常；手术组大鼠12h时出现CD45阳色细胞,3天最多(与正常组及假手术组比较差异显著p0.01),持续2天,14天恢复至正常范围；正常组和假手术组大鼠上述指标均无明显变化。 3手术组大鼠大脑皮层TNF-α、ICAM-1和IL-1p表达于12h开始增多,第3天达高峰(与假手术组比较差异显著p0.01)。IL-1p表达高峰持续2天,7天时减少,14天时恢复正常：TNF-α、ICAM-1于5天后降低,7天时恢复正常。TNF-α和IL-1β以胶质细胞表达为主,而ICAM-1以血管内皮细胞表达为主,胞浆或胞膜着色。正常组和假手术组大鼠不表达TNF-α,微量表达ICAM-1、IL-1β。 4相关性分析：IL-1p表达与ICAM-1的表达呈同步性变化,两者具有高度相关性(r=0.789；P0.01)；TNF-α表达与ICAM-1表达是同步性变化,二者有高度相关性(r=0.743；P0.05)；CD45阳性细胞与ICAM-1表达呈同步性变化,两者具有高度相关性(r=0.821；P0.01)；MPO活性与ICAM-1的表达具有中度相关性(r=0.591;0.01)；CD45表达与尼氏染色具有中度相关性(r=0.691;0.05)；MPO活性与尼氏染色具有高度相关性(r=0.725；P0.05)。结论： 1大鼠脑淋巴引流阻滞后皮层神经元肿胀、坏死。 2大鼠脑淋巴引流阻滞后皮层有TNF-α、IL-1β表达以及ICAM-1的表达和白细胞的浸润。 3炎症因子TNF-α、IL-1β表达与白细胞的浸润具有相关性,白细胞浸润和神经元损伤具有相关性。 4.大鼠脑淋巴引流阻滞后脑内TNF-α、IL-1β通过ICAM-1的表达介导白细胞浸润,TNF-α、IL-1β和浸润的白细胞可能参与淋巴引流阻滞性脑损伤的病理过程。
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【学位授予单位】：泰山医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2005
【分类号】：R363

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