17β-雌二醇通过上调CXCR4表达促进骨髓间充质干细胞的趋化迁移

发布时间：2019-03-06 07:34

【摘要】：目的研究17β-雌二醇(17β-estradiol,17β-E2)对体外骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)趋化因子受体CXCR4表达的影响及CXCR4表达变化对BMSCs趋化迁移的调控情况。方法全骨髓法+贴壁法分离、培养BMSCs,不同浓度(10-10、10-9、10-8、10-7、5×10-7、10-6mol/L)的17β-雌二醇诱导经雌激素受体拮抗剂ICI182780处理和未经处理的BMSCs后于不同时相点(24、48 h),用RT-PCR法和Western blot法分别检测细胞趋化因子受体CXCR4的表达情况,利用Transwell小室体外迁移体系观察10-7mol/L 17β-雌二醇诱导前后的BMSCs对于不同浓度基质细胞衍生因子SDF-1的定向迁移情况,及采用AMD3100阻断SDF-1特异性受体CXCR4后对雌激素诱导前后BMSCs定向迁移的影响。结果 BMSCs在不同浓度17β-雌二醇诱导24、48 h后,其CXCR4 mRNA的表达均有不同程度的升高,其中以24 h时10-7mol/L组升高最为明显(P0.05)。CXCR4蛋白表达在24 h各浓度组以升高为主,24 h时5×10-7mol/L组升高最为明显,48 h各浓度组以降低为主。雌激素受体拮抗剂ICI 182780能够明显抑制17β-雌二醇对CXCR4表达的影响(P0.05)。BMSCs对SDF-1的定向迁移有明显的浓度依赖性,且相同条件下17β-雌二醇诱导后的BMSCs迁移细胞数显著高于未经诱导的BMSCs,而CXCR4阻断剂AMD3100可明显抑制17β-雌二醇干预前后BMSCs的趋化迁移(P0.05)。结论 17β-雌二醇在一定的诱导时间内可提高BMSCs CXCR4的表达,进而增强SDF-1对BMSCs的体外趋化作用。
[Abstract]:Aim to investigate the effect of 17 尾-estradiol,17 尾-E2 on the expression of chemokine receptor CXCR4 in bone marrow mesenchymal stem cells (bone mesenchymal stem cells,BMSCs) in vitro and the regulation of CXCR4 expression on chemotactic migration of BMSCs. Methods 17 尾-estradiol (17 尾-estradiol) with different concentrations of BMSCs, (10? 10, 10? 9, 10? 8, 10? 10, 5 脳 10? 7, 10? 6? mol / L) was isolated by whole bone marrow attachment method and induced by estrogen receptor antagonist ICI182780 and untreated BMSCs at different time points (24, 48 h),) after being treated with 17 尾-estradiol at different time points (24, 48 h),) after being treated with estrogen receptor antagonist ICI182780 and untreated BMSCs at different time points (24, 48 h),). The expression of chemokine receptor CXCR4 was detected by RT- PCR and Western blot, respectively. The directional migration of 10-7mol/L-17 尾-estradiol (10-7mol/L-17 尾-estradiol) to different concentrations of stromal cell-derived factor SDF-1 was observed by Transwell cell migration system in vitro. And the effect of blocking SDF-1-specific receptor CXCR4 by AMD3100 on the directed migration of BMSCs before and after estrogenic induction. Results the expression of CXCR4 mRNA in BMSCs was increased at different concentrations of 17 尾-estradiol for 24 h and 48 h, especially in 10-7mol/L group (P0.05). The expression of CXCR4 protein was mainly increased at 24 h after exposure to 17 尾-estradiol, and the expression of CXCR4 protein was mainly increased at 24 h after exposure to 17 尾-estradiol, and the expression of CXCR4 in 10-7mol/L group was significantly higher than that in control group. At 24 h, the increase of 5 脳 10-7mol/L group was the most obvious, and the decrease of each concentration group at 48 h was the most obvious. Estrogen receptor antagonist ICI 182780 could significantly inhibit the effect of 17 尾-estradiol on the expression of CXCR4 (P0.05). BMSCs had a significant concentration-dependent effect on the directed migration of SDF-1. Under the same conditions, the number of BMSCs migration cells induced by 17 尾-estradiol was significantly higher than that of uninduced BMSCs, and CXCR4 blocker AMD3100 could significantly inhibit the chemotactic migration of BMSCs before and after 17 尾-estradiol intervention (P0.05). Conclusion 17 尾-estradiol can increase the expression of BMSCs CXCR4 and enhance the chemotactic effect of SDF-1 on BMSCs in vitro.
【作者单位】： 第三军医大学西南医院妇产科;
【基金】：国家自然科学基金面上项目(81170533)~~
【分类号】：R329.2

【参考文献】

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本文编号：2435326