黄热疫苗病毒17D株在Vero细胞上的适应性传代

发布时间：2019-04-16 11:09

【摘要】：为建立黄热疫苗病毒17D株的Vero细胞适应株,将黄热疫苗病毒在Vero细胞上培养,通过蚀斑筛选,然后进行适应性传代,并进行稳定性研究。 将鸡胚黄热疫苗病毒在Vero细胞上进行了适应性培养,确定了传代培养条件,MOI为0.1 PFU/cell,接种方式为分种,培养温度为37℃。对2个批号的鸡胚黄热减毒活疫苗病毒进行了2次蚀斑筛选,并连续传代,获得了YFV-Vero(5)-A1、YFV-Vero(5)-A2、YFV-Vero(5)-B1和YFV-Vero(5)-B2等4株Vero细胞适应株病毒。经过传代后的稳定性研究表明,4株Vero细胞适应株病毒可被黄热病毒(17D)猴免疫血清中和,证实确为黄热17D株病毒。在传代过程中不同代次的病毒滴度稳定在6.9Lg PFU/ml以上,各代病毒蚀斑直径大小没有变化,高峰病变出现时间为5～7天。免疫原性研究结果表明,用BHK-21细胞和Vero细胞为基质进行中和试验,家兔和小鼠的免疫血清均可中和3批不同批号的鸡胚黄热减毒活疫苗,中和抗体效价为1:1280～1:5120,显示了4株Vero细胞适应株病毒良好的免疫原性。 初步试验结果表明,已获得的4株黄热减毒活疫苗Vero细胞适应株病毒,其病毒滴度高且稳定,中和抗体效价高,免疫原性良好。以后需进一步做猴体神经毒力试验以证实其遗传稳定性,做病毒株的全序列测定以分析其基因稳定性。
[Abstract]:In order to establish the Vero cell adaptation strain of yellow fever vaccine virus 17D strain, yellow fever vaccine virus was cultured on Vero cells, screened by plaque, then passaged adaptively, and the stability of the virus was studied. Chicken embryo yellow fever vaccine virus was cultured adaptively on Vero cells, and the subculture conditions were determined. MOI was 0.1 PFU/cell, and the culture temperature was 37 鈩，

本文编号：2458725