硫酸酯化马尾松花粉多糖对小鼠脾脏B淋巴细胞免疫调节作用的研究
[Abstract]:The effects of the extract of 60% ethanol on the proliferation of B-lymphocytes, the concentration of intracellular free calcium ([Ca2 +] i) and the antibody production were studied. the crude polysaccharide and the ethanol are separated and purified by the water-boiling alcohol precipitation method to obtain the polysaccharide component D, and the polysaccharide component D is obtained by the separation and purification of the Sephacryl S-400HR, the component D is subjected to sulfuric acid esterification by using the chlorosulfonic acid salt-removing method, the B-lymphocyte is separated by the nylon wool method, the proliferation of the B-lymphocyte and the MTT method is determined by the MTT method, The generation of B-cell antibody was determined by fluorescence spectrophotometer in the determination of B-lymphocyte[Ca 2 +] i, haemolytic plaque assay (PFC) and quantitative hemolysis (QHS). The results showed that SPP60-D could significantly increase the proliferation of B-lymphocytes and[Ca 2 +] i (P0.01). After the action of TAK-242, LY294002, U73122, low-molecular weight heparin, verapamil and 2-APB, the[Ca2 +] i induced by SPP60-D and PPM60-D could be inhibited (P0.05 or P0.01); and the detection of PFC and QHS confirmed that, SPPM60-D plays a significant role in promoting the differentiation of B-lymphocytes and the formation of antibodies, and the effect of PPM60-D is weak. The above research shows that the activity of PPM60-D is obviously improved after the esterification of sulfuric acid, and it is presumed that the SPPM60-D can be combined with the TOLL-like receptor 4 (TLR4) on the B-lymphocytes, and the calcium channel (CRAC) released by the calcium bank is opened by the TLR4-PI3K-PLC-IP3R signal path, so that the[Ca2 +] i is raised to activate the B-lymphocyte, So as to improve the in vitro proliferation and the antibody generation ability.
【作者单位】: 山东省动物抗性生物学重点实验室 山东师范大学生命科学学院;
【基金】:山东省自然科学基金(批准号:Y2008D13)资助的课题~~
【分类号】:R392
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本文编号:2518568
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