硒化乳酸菌胞外多糖对体外培养小鼠脾淋巴细胞分泌NO、IL-4及IL-12的影响
【图文】：
EPSConA-EPS050100200400多糖质量浓度/μg·mL-150403020100NO浓度/μmo·lL-1abab注：a：与空白组相比有显著差异（p<0.05）；b：与EPS组相比有显著差异（p<0.05）。下同。图1不同质量浓度硒化EPS对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞分泌NO的影响Fig.1EffectofSe-EPSwithdifferentconcentrationonNOinductionofspleenlymphocyteactivitiedbyConAinvitroLPS-硒化EPSLPS-EPS6050403020050100200400多糖质量浓度/μg·mL-1NO浓度/μmo·lL-1图2不同质量浓度硒化EPS对LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞分泌NO的影响Fig.2EffectofSe-EPSwithdifferentconcentrationonNOinductionofspleenlymphocyteactivitiedbyLPSinvitroaaab1.2实验动物ICR小鼠，体重18～22g，雄性，，8周；宁波大学动物中心提供。1.3仪器与设备MCO-18AICCO2培养箱，日本SANYON；680型自动酶标仪，美国Thermo公司；飞鸽TDL-40C低速离心机，上海安亭仪器厂；倒置显微镜，日本Olympus公司。1.4试验方法1.4.1小鼠脾淋巴细胞悬液制备脱臼处死小白鼠，75%酒精浸泡5min。无菌取小鼠脾脏，研磨，200目尼龙网过滤，1000r/min离心10min。3倍体积红细胞裂解液裂解2min去除红细胞，无血清培养基洗涤2次。台盼蓝染色确定细胞存活率大于95%。37℃，5%CO2培养2h去除贴壁细胞，调整细胞浓度2×106cells/mL[13]。1.4.2NO测定分别向细胞悬液中加入ConA（终质量浓度为5μg/mL）和LPS（终质量浓度为200ng/mL），接种到96孔细胞培养板中，每孔100μL，再分别加入EPS和硒化EPS，使终质量浓度为50，100，200，400μg/mL，另设ConA、LPS对照孔，细胞调零孔（各种处理均作3个平行孔）。3
第14卷第3期ckseEPS403020100481224作用时间/h图3不同时间下硒化EPS对conA诱导的小鼠脾淋巴细胞分泌NO的影响Fig.3EffectofSe-EPSonNOinductionofspleenlymphocyteactivatedbyconAinvitroatvarioustimeNO浓度/μmo·lL-150403020100ckseEPS481224作用时间/h图4不同时间下硒化EPS对LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞分泌NO的影响Fig.4EffectofSe-EPSonNOinductionofspleenlymphocyteactivatedbyLPSinvitroatvarioustimeConA-SeConA-EPSA450nmA450nmLPS-SeLPS-EPS多糖质量浓度/μg·mL-1图5不同浓度硒化EPS对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞分泌IL-4的影响Fig..5EffectofSe-EPSwithdifferentconcentrationonIL-4inductionofspleenlymphocyteactivitiedbyConAinvitro图6不同浓度硒化EPS对LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞分泌IL-4的影响Fig.6EffectofSe-EPSwithdifferentconcentrationonIL-4inductionofspleenlymphocyteactivitiedbyLPSinvitro多糖质量浓度/μg·mL-12.1.2培养时间对NO分泌的影响如图3、图4EPS和硒化EPS对于ConA刺激的T淋巴细胞和LPS刺激的B淋巴细胞NO分泌随时间的变化趋势一致。与对照组相比，培养4h后上清液中NO浓度显著升高，培养8h达到最大，随后降低。培养24h后细胞培养上清液中NO浓度与对照组相比无显著差异。2.2EPS和硒化EPS对体外培养小鼠脾淋巴细胞分泌IL-4的影响如图5、图6EPS和硒化EPS对ConA活化的T淋巴细胞分泌IL-4起抑制作用，低浓度硒化EPS可增加IL-4分泌量，随着浓度的升高抑制作用趋于明显，高浓度EPS可显著抑制IL-4分泌。对于LPS活化的B淋巴细胞，硒化EPS除在200μg/mL浓度下可升高IL-4分泌量外，主要起抑制作用，
【作者单位】： 宁波大学海洋学院食品系;南京师范大学食品系;
【基金】：浙江省自然基金重点项目(No.Z3110211) 国家自然科学基金项目(No.41276121) 宁波市重大攻关项目(No.2011C11017)
【分类号】：R329.2
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本文编号：2550140
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