锌指蛋白A20对氧化性低密度脂蛋白介导的巨噬细胞与血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制的研究

发布时间：2019-11-03 06:13

【摘要】：动脉粥样硬化(AS)性血管疾病是现代社会人类死亡的首要原因。AS是多种病因造成的始发于动脉壁内膜的一系列复杂的分子和细胞改变的结果，最近成为许多疾病的诱发因素。大量的证据表明，血浆低密度脂蛋白(LDL)水平升高是心血管疾病的主要危险因素，血循环中的脂蛋白过多时，就会在动脉壁处堆积，滞留于血管内皮下间隙，发生脂质过氧化，形成氧化性低密度脂蛋白(OxLDL)。OxLDL在促进AS发生发展中发挥着重要的作用，如诱导巨噬细胞的黏附、趋化；诱导黏附分子的表达：泡沫细胞形成；诱导巨噬细胞的凋亡；促进血管平滑肌细胞的增殖与迁移等。 A20是一种存在于胞浆中的NF-κB活性负反馈调控蛋白，TNF-α、白介素1(IL-1)、脂多糖(LPS)、CD40、外毒素等都能够诱导所有组织细胞表达A20。A20具有阻止TNF-α诱导的包括外周血白细胞等在内许多组织细胞发生凋亡的功效，因此在凋亡研究领域，A20又被称为抗凋亡蛋白A20。由于巨噬细胞与血管平滑肌细胞在AS中起重要作用，也是AS发生、发展过程中发生病理生理改变的主要两种细胞。因此本研究拟探讨A20对OxLDL诱导的巨噬细胞的凋亡的作用及其分子机制的影响，同时探讨A20对OxLDL介导的血管平滑肌细胞的增殖、迁移及凋亡的影响，同时分析这些作用的分子机制。我们的结果如下： OxLDL对RAW264.7细胞的生长有明显的抑制作用，其抑制作用具有时间与浓度依赖性。而nLDL在相同时间、浓度时对RAW264.7细胞的生长抑制则无显著差异。但是，在A20高表达的细胞，细胞活性没有明显改变，细胞依然生长良好。用Hochest 33258染色、流式细胞仪以及琼脂糖凝胶电泳共同分析细胞凋亡的发生，结果表明，AdGFP感染的对照组的细胞，可见细胞核内Hochest 33258染色DNA强蓝色荧光体，细胞核发生核固缩、碎裂，出现了G_1亚二倍体峰，，琼脂糖凝胶电泳出现了不连续的电泳条带，呈阶梯状结构。但是，A20的表达显著的抑制了以上凋亡现象的发生。该结果从生物化学的角度进一步证明了OxLDL剂量、时间依赖性地诱导RAW264.7细胞的凋亡，而A20的表达能够抑制这种凋亡的发生。通过对A20抗凋亡机制的分析，本研究发现OxLDL时间与浓度依赖性地诱导了NF-κB
【学位授予单位】：中国协和医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2005
【分类号】：R363

【引证文献】