鼠抗人ICOS单克隆抗体的研制及GL50-ICOS信号对T细胞共刺激作用的研究

发布时间：2019-11-13 07:05

【摘要】：ICOS(Inducible Costimulator)及其配体GL50是新近发现的CD28／B7家族的一对新成员。ICOS主要表达在活化的T细胞上，GL50可持续表达在B淋巴细胞、巨噬细胞表面或诱导表达于成纤维细胞表面。GL50-ICOS的相互作用，对机体再次免疫应答过程中T细胞的增殖、活化、分化、细胞因子的分泌以及B细胞的增殖、分化、抗体分泌等都发挥了重要的作用。目前的研究业已证明：GL50-ICOS信号途径在机体炎症、自身免疫性疾病、肿瘤和移植排斥等免疫应答过程中发挥着重要的调节作用。对该信号途径的有效调节将不仅为理解人体复杂、精细的免疫应答系提供新的视角，而且还具有潜在的临床应用前景。因此特异性鼠抗人ICOS单克隆抗体的研制在为研究GL50-ICOS信号途径生物学效应提供有力的研究工具的同时，也具有潜在的临床应用价值。一分泌鼠抗人ICOS单抗的杂交瘤细胞株的制备及其生物学特性的鉴定以肺癌病人胸水中高表达ICOS的活化T细胞为免疫原，免疫BALB／c小鼠，采用B淋巴细胞融合技术，将反复免疫后的小鼠的脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2／0进行细胞融合，以ICOS-L929转基因细胞作为阳性筛选细胞，以转空载体的对照细胞mock-L929作为阴性对照细胞，经免疫荧光标记分析及抗体分泌阳性孔内杂交瘤细胞的反复筛选，并经多次克隆化培养，最终获得1株持续、稳定分泌鼠抗人ICOS单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为3F8。经快速定性试纸法分析鉴定，3F8的重链为IgG1；而轻链为κ。经体外连续传代(40代)培养，液氮冻存半年后复苏，仍生长良好，稳定分泌抗体。继而采用本室建立的腹水诱生和纯化方案，腹水形成阳性
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2006
【分类号】：R392

【参考文献】