SD大鼠皮质骨来源间充质干细胞的培养与鉴定

发布时间：2019-12-04 11:34

【摘要】：【目的】研究大鼠皮质骨来源间充质干细胞(MSCs)的分离培养及鉴定的方法。【方法】取SPF级体质量60~80 g的SD大鼠3只,运用骨髓贴壁法及胶原酶消化皮质骨法培养间充质干细胞,进行形态学观察、体外增殖能力考察、细胞周期分析、细胞表面抗原免疫荧光鉴定,并采用茜素红染色和油红O染色鉴定所培养细胞的成骨与成脂分化潜能。【结果】胶原酶消化皮质骨法及骨髓贴壁法均能有效分离纯化大鼠MSCs,经形态学、细胞表面抗原免疫荧光鉴定、成骨及成脂分化能力检测证实为间充质干细胞。【结论】自骨髓及皮质骨均能实现间充质干细胞的分离纯化,但皮质骨间充质干细胞来源广泛,原代不受血细胞干扰,是骨髓来源间充质干细胞的很好补充。
【图文】：

生长曲线,间充质干细胞,来源,皮质骨

ぶ使抢丛?（图1－F）间充质干细胞呈梭形生长，少数呈多角形，细胞核染成紫红色。2．2生长曲线2种方法培养的间充质干细胞P1代细胞生长曲线相似，图2结果显示：细胞3～7d处于对数生长期，之后细胞生长到达平台期。2．3细胞周期流式细胞仪细胞周期分析结果显示：骨髓间充质干细胞84．91％处于G0／G1期（图3－A），皮质骨间充质干细胞88．04％处于G0／G1期（图3－B），表明骨髓与皮质骨来源间充质干细胞都具有较强增殖潜能。图2P1代骨髓来源与皮质骨来源间充质干细胞生长曲线Figure2GrowthcurveofP1generationofbonemarroworiginandcorticalbonederivedmesenchymalstemcellsDt／d13579第3期453

相关性分析,来源,皮质骨,间充质干细胞

广州中医药大学学报2014年第3期0．60．40．20－0．2－0．4－0．6－0．8相关系数IL－4（pg／mL）IFN－γ（pg／mL）Th1／Th2IL－17（pg／mL）T－betGATA－3T－bet／GATA－3RORgammat①①①①①①①FEV0．3（mL）FEV0．3／FVC（％）PEF（mL／s）肺功能参数图3肺功能参数与其他指标相关性分析Figure3Correlationoflungfunctionindexeswithotherindicators（“SD大鼠皮质骨来源间充质干细胞的培养与鉴定”的彩图，正文见第453页）骨髓来源皮质骨来源原代第2天第3代第2代Giemsa染色图1不同时期骨髓来源和皮质骨来源间充质干细胞的形态学观察（×100）Figure1Morphologyofbonemarroworiginandcorticalbonederivedmesenchymalstemcellsatdifferentphases（×100）①P＜0．05（“基于T－bet、GATA－3、RORgammat调控Th细胞研究六味补气胶囊对慢性阻塞性肺病大鼠肺功能的影响”的彩图，，正文见第407页）494

【参考文献】