抗CD3人鼠嵌合抗体轻链在毕赤酵母中大规模发酵表达的研究

发布时间：2019-12-05 01:01

【摘要】： 本研究选择酵母偏爱密码子同义替换鼠源性抗CD3抗体轻链可变区基因(Vκ),与人源性轻链恒定区(Cκ)基因连接,构建完整的人鼠嵌合抗体轻链。将构建的完整的人鼠嵌合表达载体转化X-33毕赤酵母,建立兼具原核系统良好操作性和真核系统后加工性的重组抗CD3抗体毕赤酵母真核表达体系。在初步研究了发酵最佳条件后在80L发酵罐中进行大规模发酵表达,并对后续下游纯化条件做了初步探讨。结果表明,本研究正确构建了重组抗CD3抗体毕赤酵母真核表达体系,经甲醇诱导能够分泌重组抗CD3抗体轻链蛋白,重组抗CD3抗体轻链的表达具有累积效应,产量在一段时间内随表达时间延长而增加。本研究为进一步用毕赤酵母作为生物反应器大规模生产抗CD3抗体提供了实验依据。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：R392

【参考文献】

中国期刊全文数据库前10条

1 武国军,王智,郝晓柯,王禾,白玉杰,张盈华,药立波;抗前列腺特异抗原/CD3双特异单链抗体的构建及表达[J];第四军医大学学报;2001年03期

2 吕慧;单克隆抗体在预防及治疗移植物抗宿主病中的作用[J];国外医学(儿科学分册);2002年04期

3 陈国江,黎燕;抗CD3单克隆抗体的作用机制及其在临床上的应用[J];国外医学.药学分册;2005年01期

4 匡志鹏;谢裕安;梁安民;罗小玲;吴继宁;;细胞因子诱导的杀伤细胞的生物学特性及抗肿瘤作用研究[J];广西医学;2006年08期

5 欧阳立明,张惠展,张嗣良,刘志敏;巴斯德毕赤酵母的基因表达系统研究进展[J];生物化学与生物物理进展;2000年02期

6 杨晟,黄鹤,章如安,钱美琴,余有浩,钱雪明,袁中一;重组人血清白蛋白在Pichia pastoris中分泌表达影响因素的研究[J];生物工程学报;2000年06期

7 李晶,赵晓祥,沙长青,张淑梅,田洁萍;甲醇酵母基因表达系统的研究进展[J];生物工程进展;1999年02期

8 彭毅,杨希才,康良仪;影响甲醇酵母中外源蛋白表达的因素[J];生物技术通报;2000年04期

9 武国军,王智,王栋,袁建林,王禾,郝晓柯;抗人γ-精浆蛋白V_H单域抗体/人p53四价功能域融合基因的构建及空间构象分析[J];西安医科大学学报;2001年06期

10 武国军,王禾,王栋,于磊,王智,袁建林,张波,药立波;抗人CD3单链抗体四聚体基因在HeLa细胞中的表达和活性鉴定[J];西安交通大学学报(医学版);2003年06期