利用噬菌体肽库技术筛选SARS冠状病毒N蛋白B细胞表位的研究

发布时间：2020-01-22 21:22

【摘要】：研究背景与目的：SARS的流行给人民的身体健康和社会经济发展带来了巨大的威胁。目前对SARS尚无特效的治疗措施，80％的患者在前两个阶段，即病毒复制期和超敏反应期，，经过及时有效的器械辅助及药物治疗后可出现好转，并最终治愈。由于该病是新近发生的传染病，造成的危害已远远超出了疾病本身的范畴，有关的发病机制、诊断及防治等方面的深入研究均是急需解决的问题。 核衣壳(N)蛋白是SARS冠状病毒(SARS-CoV)重要的结构蛋白，位于SARS—CoV的核心，由422个氨基酸组成，分子量约46kDa。N蛋白在宿主细胞质中合成后迅速磷酸化，并和包膜蛋白的羧基末端与病毒基因组RNA结合形成核衣壳。综合目前对N蛋白的研究成果，可知N蛋白广泛分布在SARS病人的多个器官和组织，其基因组序列基本保守，具有良好的抗原性。研究表明针对N蛋白的抗体产生早，引起的免疫反应强烈而持久，所以N蛋白不仅是SARS疫苗的候选分子，而且是良好的可应用于病毒感染早期诊断的靶抗原。 本实验室曾用灭活的SARS全病毒免疫小鼠，并通过一系列的筛选和配对试验，得到88株亲和力高、特异性强的抗SARS-CoV N蛋白的单克隆抗体。本研究拟选择这些单克隆抗体与N蛋白进行ELISA配对试验，鉴定出针对N蛋白不同表位的单克隆抗体，然后利用这些单抗采取ELISA夹心法亲和筛选噬菌体随机十二肽库，最后通过测序分析得到N蛋白的不同表位，然后绘制表位图。为SARS的早期诊断及SARS基因工程疫苗的研制奠定基础。
【图文】：

冠状病毒颗粒模式图

图2:电镜卜的SARS病毒F192:SARS一CoVnieleetronPhotomciroseoPeSARS一CovN蛋白的生物学特性白是SARS冠状病毒重要的结构蛋白，位于SARS一CoV的核心中合成后迅速发生磷酸化，并和M蛋白的梭基末端与病毒基因核衣壳。N蛋白具有3个结构域，其中央区与基因组RNA结合，
【学位授予单位】：第一军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2006
【分类号】：R392

【参考文献】

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本文编号：2572076