供者特异性脾细胞输注诱导外周耐受小鼠不同组织细胞内NF-κB p65的活性变化

发布时间：2020-03-24 00:14

【摘要】： 目的:转录因子NF- B是一种广泛存在于真核细胞内,能将信息从胞质传至胞核引起相应基因表达的重要转录因子。关于NF- B p65在调节外周耐受方面的作用尚未见报道。本课题利用供者特异性脾细胞输注(donor specific spleen cell transfusion, DST)诱导外周耐受后,观察小鼠不同组织细胞内NF- B p65活性的变化,以探讨其在外周耐受发生过程中的活性改变及其意义。方法:实验以BALB/c小鼠为供者,输注1×108个供者脾细胞3天和7天的C3H小鼠为受者,建立皮肤移植模型,每天观察移植物的生长情况并于术后第7天取移植皮片和脾脏,通过对移植物的存活时间、移植皮片的组织病理学检查和抗原特异性淋巴细胞增殖试验(Alamarblue染色)来了解免疫功能的改变;并以免疫组化染色方法(SP染色)检测小鼠脾脏和皮肤移植物中NF- B p65活性的变化。结果:输注后第7天手术组、输注后第3天手术组和对照组皮肤移植物的存活时间(MST)分别为(15.67±1.24)d、(11.33±1.25)d和(11.25±2.05)d(n=5)。与对照组相比较,输注后第7天手术组皮肤移植物MST明显延长(p㩳0.05);输注后第3天手术组则无显著性差异(p㧐0.05)。将抗原特异性淋巴细胞经Alamarblue活细胞染色后,各组还原率为( 14.9804±0.82473 ) %、(14.7864±0.79468)%和(21.0488±2.39681)%。与对照组相比较,输注后第3天手术组和输注后第7天手术组抗原特异性淋巴细胞的增殖反应均明显受抑制(p㩳0.05)。对照组和输注后第3天手术组移植皮片的组织层次和血管结构均不清晰,并可见弥漫性的淋巴细胞浸润;输注后第7天手术组仅见少量的淋巴细胞浸润,且皮片的组织层次和血管结构均完整无明显坏死。各组皮肤移植物NF- B p65表达阳性细胞百分数分别为(62.356±16.626)%、(25.452±18.650)%和(26.343±23.980)%;各组脾脏细胞NF- B p65表达阳性率分别为(5.37±0.523)%、(8.815±1.775)%和(11.08±1.0173)%。与对照组相比较,输注后第3天手术组受体移植皮片及周围组织中NF- B p65的活性无显著性差异(p㧐0.05);输注后第7天手术组受体移植皮片及周围组织中NF- B p65的活性增加(p㩳0.05)。与对照组相比较,输注后第3天手术组受体脾脏中NF- B p65的活性无显著性差异(p㧐0.05);输注后第7天手术组受体脾脏中NF- B p65的活性降低(p㩳0.05)。结论:移植前7d经尾静脉输注供者特异性脾细胞可诱导外周免疫耐受。外周耐受的产生可能与不同部位的免疫细胞内NF- B p65活性改变有关。
【图文】：

输注,HE染色,对照组

图 1 术后第 7 天小鼠皮肤移植物组织病理学检查结果（HE 染色×400）A：对照组；B：输注后第 3 天手术组；C：输注后第 7 天手术组。Fig.1 Histologic examination of skin allografts at 7days after transplantation(HE×400)

供者特异性脾细胞输注诱导外周耐受小鼠不同组织细胞内NF-κB p65的活性变化

术后第7天小鼠皮肤移植物及脾脏免疫组化检查结果（SP染色×400）
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2006
【分类号】：R392

【参考文献】