人骨髓基质细胞的生物学特性及其分化的研究

发布时间：2020-04-15 02:48

【摘要】： 第一部分 人骨髓基质细胞的体外培养及其表型、组分分析 目的 体外培养和扩增人骨髓基质细胞，并探讨其表型及 细胞组成。方法 体外静置贴壁培养和扩增人骨髓基质细胞，采用流 式细胞仪检测培养五代的骨髓基质细胞表面抗原CD33、CD34、 CD38、CDw90的表达情况和细胞DNA的含量。另外，通过免疫细 胞化学染色技术检测了不同代次儿童骨髓基质细胞的波形纤维蛋白 （Vimentin）、结蛋白（Desmin）、α-平滑肌肌动蛋白（α-Smooth Muscle Actin）和Ⅷ因子相关抗原（Von Willebrand Factor）的表达。结果 人 骨髓基质细胞体外可培养传代至第九代。第五代基质细胞S期细胞含 量仅占16.1％，说明其分裂增殖能力已下降；CD33、CD34表达极低， 说明该培养方法所得的第五代细胞基本无造血细胞。另外，Vimentin 在传代过程中的表达水平逐渐下降，Desmin、α-Smooth Muscle Actin 单克隆抗体和Von Willebrand Factor抗体染色呈阴性。结论 本文中的 骨髓基质细胞来源于间充质细胞，并不含血管内皮细胞；骨髓基质细 胞的组成和表型与体外培养条件有关。 第二部分 不同发育阶段的人骨髓基质细胞对多种病毒的敏感性 探讨不同发育阶段的人骨髓基质细胞对多种病毒的敏感 性。方法 采用静置贴壁培养法，体外长期培养了胎儿、儿童和成人 骨髓基质细胞，并将传至5代以上的骨髓基质细胞采用微量细胞病变 （CPE）法，开展了对5种病毒的敏感性试验。结果 人骨髓基质细 胞对滤泡性口腔炎病毒（VSV），脊髓灰质炎病毒（Poliov）、Ⅰ型和Ⅱ 型单纯疱疹病毒（HSVⅠ、Ⅱ）均敏感，能产生明显的CPE，其效价 （TCID_(50)）可达10~(-3)—10~(-4)，其中胎儿骨髓基质细胞对病毒敏感性至少比 儿童高2倍，比成人高4倍，，即胎儿＞儿童＞成人，但对B_3型柯萨奇 病毒均不敏感。结论 人骨髓基质细胞对VSV、Poliov、HSV-Ⅰ和
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2001
【分类号】：R392.12

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 田发青;罗绍凯;李娟;;骨髓瘤微环境血管生成的最新研究进展[J];中山大学研究生学刊(自然科学.医学版);2011年01期

2 ;[J];;年期

3 ;[J];;年期

4 ;[J];;年期

5 ;[J];;年期

6 ;[J];;年期

7 ;[J];;年期

8 ;[J];;年期

9 ;[J];;年期

10 ;[J];;年期

相关会议论文 前10条

1 沈健;俞康;;血宝和再障患者血清对骨髓基质细胞的影响[A];中华医学会第11届全国内科学术会议论文汇编[C];2007年

2 方希敏;李原;钱江潮;周海霞;王菊香;曾炜炜;徐霞;;正常骨髓基质细胞对HL-60细胞分化作用的初探[A];第六届江浙沪儿科学术会议暨儿科学基础与临床研究进展学术班论文汇编[C];2009年

3 丰盛梅;高建军;顾淑珠;金慰芳;;增龄过程中大鼠骨髓基质细胞PPARγ和Cbfα1表达的相关性研究[A];第七届全国老年医学学术会议暨海内外华人老年医学学术会议论文汇编[C];2004年

4 袁成良;;17β-雌二醇对骨髓基质细胞PPAR-γ2 mRNA表达的影响[A];中华医学会第三次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议暨骨质疏松诊断技术继续教育学习班论文汇编[C];2004年

5 童秀珍;罗绍凯;李娟;邹外一;彭爱华;张祥忠;洪文德;张国材;;系统性红斑狼疮患者骨髓基质细胞IFN-γ、TNF-α mRNA的表达[A];中华医学会第八次全国血液学学术会议论文汇编[C];2004年

6 杨志军;罗永春;张洪钿;戴宜武;徐如祥;;Sinerem标记大鼠骨髓基质细胞及移植后活体示踪研究[A];中华医学会神经外科学分会第九次学术会议论文汇编[C];2010年

7 金小岚;;雌二醇对骨髓基质细胞向成骨细胞分化的影响[A];中华医学会第三次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议暨骨质疏松诊断技术继续教育学习班论文汇编[C];2004年

8 杨述华;刘日光;;脱蛋白骨复合转染VEGF基因骨髓基质细胞治疗股骨头缺血坏死的实验研究[A];跨世纪骨伤杰出人才科技成果荟萃[C];2004年

9 曾东风;孔佩艳;陈幸华;常城;张曦;彭贤贵;高蕾;;阻抑HIF-1α基因表达对急性白血病骨髓基质细胞SDF-1、VEGF表达的影响[A];第11次中国实验血液学会议论文汇编[C];2007年

10 朱波;邹仲敏;罗成基;郭朝华;林远;程天民;;放射损伤后骨髓基质细胞IL-6表达的变化及其与NF-kB的关系[A];面向二十一世纪的生物医学体视学和军事病理学论文摘要汇编[C];2000年

相关重要报纸文章 前10条

1 王雪飞 张秀花;修复软骨 骨髓基质细胞是最佳种子[N];健康报;2004年

2 匡远深;治脑损伤可用骨髓细胞[N];健康报;2003年

3 ;单唾液酸四己糖神经节苷脂诱导成年大鼠骨髓基质细胞成为神经前体细胞及其分化作用的研究[N];中国医药报;2003年

4 匡远深;我国一项神外基础实验研究取得成果[N];中国医药报;2003年

5 通讯员　匡远深;骨髓基质细胞移植治疗脑梗塞取得突破[N];光明日报;2003年

6 吴一福;心脏组织工程研究新进展[N];中国医药报;2004年

7 冯友根;辛伐他汀促成骨作用研究[N];中国医药报;2004年

8 朱国旺;防治骨质疏松我们共同的责任[N];中国医药报;2002年

9 ;组织工程学研究概况（二）[N];中国医药报;2000年

10 张 力;帕金森病神经干细胞移植治疗进展[N];中国中医药报;2004年

相关博士学位论文 前10条

1 王吉刚;TRAIL逆转白血病骨髓基质细胞粘附介导Jurkat细胞耐药的研究[D];第三军医大学;2005年

2 刘占川;rhG-CSF动员自体骨髓基质细胞治疗鼠局灶性脑缺血实验研究[D];吉林大学;2006年

3 金钫;组织工程骨修复牙槽骨缺损与正畸牙齿移动[D];第四军医大学;2004年

4 崔玉明;组织工程化软骨修复兔关节软骨缺损及其相关研究[D];第四军医大学;2004年

5 梁蓉;正常人骨髓成纤维样基质细胞系对急性髓细胞性白血病细胞增殖、分化和凋亡的影响[D];第四军医大学;2004年

6 朱国强;IGF-1基因转染骨髓基质细胞应用于牙周组织工程的基础与动物实验研究[D];第四军医大学;2004年

7 宋艳秋;抗VEGF靶向治疗白血病的研究[D];吉林大学;2006年

8 顾祖超;自体骨髓基质细胞定向诱导成骨分化修复节段性骨缺损的实验研究[D];第三军医大学;2002年

9 赵延欣;重组人粒细胞集落刺激因子对局灶性脑缺血保护作用机制的研究[D];复旦大学;2004年

10 钟池;骨髓基质细胞静脉注射治疗大鼠短暂性局灶性脑缺血的研究[D];复旦大学;2003年

相关硕士学位论文 前10条

1 李丽娥;人骨髓基质细胞的生物学特性及其分化的研究[D];苏州大学;2001年

2 谢三平;携带GAD_（67）基因真核表达载体的构建及转染骨髓基质细胞的研究[D];华中科技大学;2010年

3 李军;兔骨髓基质细胞的培养及向成骨细胞分化的实验研究[D];山东中医药大学;2004年

4 仲维广;兔骨髓基质细胞诱导成骨及与珊瑚联合培养实验研究[D];昆明医学院;2004年

5 郭伟翔;大鼠骨髓间充质干细胞体外定向分化为心肌细胞的实验研究[D];东北师范大学;2005年

6 高全文;VEGF基因转染的骨髓基质细胞复合磷酸钙陶瓷成骨能力研究[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年

7 陈明;兔骨髓基质细胞附着于自体牙骨质片生长的体外研究[D];第一军医大学;2004年

8 周江;骨髓基质细胞和内皮细胞联合种植构建组织工程化骨的研究[D];四川大学;2003年

9 谷云风;RCAS1在再生障碍性贫血中的表达[D];山西医科大学;2010年

10 姜扬;静脉注射骨髓基质细胞治疗大鼠局灶性脑缺血BDNF表达的实验研究[D];中国医科大学;2005年

本文编号：2628040