胸腺基质细胞对热应激小鼠胸腺细胞调节作用的研究

发布时间：2020-05-06 06:54

【摘要】： 目的探讨胸腺基质细胞对正常及热应激损伤小鼠胸腺细胞的调节作用及其机制。方法取5周龄BALB/c雄性小鼠胸腺，制成小鼠胸腺细胞悬液， 43℃热应激1h后，与初代培养的小鼠胸腺基质细胞（TSC）及50％初代胸腺基质细胞培养上清（TSC-SN）共同培养，在培养的第0、6、12、 24、48h收集胸腺细胞，计数胸腺细胞总数及存活率，，用流式细胞仪分析胸腺细胞的凋亡率、表达Fas、Fas-L和HSP70的阳性率及CD4CD8 细胞亚群变化情况，并用光镜和电镜观察TSC与胸腺细胞的相互作用。结果（1）热应激使胸腺细胞凋亡率、Fas、Fas-L及HSP70表达增高，胸腺细胞凋亡与Fas、Fas-L的表达密切相关。（2）非应激的胸腺细胞与TSC共培养后，存活率增高，凋亡率及Fas、Fas-L表达降低，但细胞总数及CD4~+CD8~+（DP）细胞均显著减少，CD4~+CD8~-和CD4~-CD8~+（SP）的细胞比例明显增加。（3）与TSC共培养的热应激胸腺细胞，细胞总数显著减少，DP细胞与SP细胞均减少，HSP70的表达比热应激对照组增加，凋亡率及Fas、Fas-L的表达均低于单独培养的热应激对照组，但明显高于与TSC共培养的非应激的胸腺细胞组。（4）光镜和电镜可观察到TSC大量粘附和吞噬正常及热应激胸腺细胞，其中被TSC吞入的胸腺细胞和一些被粘附的胸腺细胞已凋亡。（5）TSC-SN可使体外培养的热应激胸腺细胞凋亡率和Fas、Fas-L表达阳性率下降，使正常胸腺细胞凋亡率和Fas表达阳性率下降，但对正常及热应激胸腺细胞HSP70 的表达无明显影响。结论（1）Fas/Fas-L介导的凋亡是体外培养胸腺细胞自发的及热应激诱导的主要死亡形式，热应激主要诱导DP胸腺细胞凋亡，HSP70 表达增高是热应激胸腺细胞损伤的标志；（2）TSC与正常胸腺细胞的直接接触具有两种生物作用，①吞噬清除DP细胞；②可能促进部分DP 细胞分化为成熟的SP细胞，使DP细胞减少，SP胸腺细胞增加；（3）热应激胸腺细胞中的DP细胞和SP细胞均可被TSC吞噬，TSC促进热应激胸腺细胞HSP70表达增高可能具有双重意义，既可保护胸腺细胞，又 l 可促进TSC识别和吞噬己受损或凋亡的胸腺细胞，发挥免疫监视作用，l IHSP70在抗原提呈中的作用，可能是热应激损伤胸腺细胞中刃细胞也 l D 可被HC识别和吞噬的分子基础；N）TSC对非应激胸腺细胞保护作用D l 明显强于对热应激胸腺细胞，胸腺细胞表达Fas、Fas千与凋亡的密切l l 关系提示一种胸腺细胞排除的机制；门）在体外，T％｛N对正常和热 l D 应激损伤的胸腺细胞有一定的保护作用。
【学位授予单位】：第一军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2000
【分类号】：R392.12

【引证文献】