小鼠胚胎消化管上皮细胞凋亡相关蛋白的表达

发布时间：2020-05-07 05:16

【摘要】： 目的 小鼠胚胎消化管形态发生主要在胚胎第11天～17天。细胞增殖和凋亡与胚胎消化管的形态发生关系十分密切。本课题拟通过观察凋亡相关蛋白P53，Bcl-2，Bax以及增殖细胞核抗原（PCNA）在胎鼠第11天～17天食管、胃、小肠、结肠上皮细胞内的表达，以探讨这些蛋白表达的时序和相互之间的关系，以及与消化管各段形态发生的关系。 方法 雌、雄小鼠交配，，取第11天～17天胎鼠，经固定、石蜡包埋、连续切片后，每间隔10张取一张贴片，做成间断连续切片，HE染色。光镜下观察间断连续切片，定位消化管食管、胃、小肠、结肠所在位置。根据定位，选出有食管、胃、小肠、结肠的切片，用免疫组织化学SABC法检测凋亡相关蛋白P53，Bcl-2，Bax以及增殖细胞核抗原（PCNA）在第11天～17天胎鼠食管、胃、小肠、结肠上皮细胞中的表达。图像分析系统测定P53，Bcl-2，Bax以及PCNA的表达强度，分析这些蛋白表达的时序和相互之间的关系，以及与四段消化管的形态发生的关系。 结果 ① Bcl-2在第11天～17天胎鼠食管、胃、小肠、结肠上皮细胞中表达的峰值均在第11天～13天，第14天开始降低，第16天和17天仅有低水平表达。② P53在消化管四段上皮细胞中的表达峰值均在第11天～14天，第15天明显降低，第16和17天仅低水平 WP=6 表达。③ Bax在食管上皮细胞中的表达峰值为第11天，然后逐渐下降；胃和小肠上皮细胞中Bax的表达峰值均在第14天；结肠上皮细胞中Bax的表达峰值在第15天。④食管和胃上皮细胞中表达PCNA的峰值均在第11天，然后逐渐降低；小肠和结肠上皮细胞中表达PCNA的峰值分别在第14天和第15天。⑤ Bcl-2在胃、小肠、结肠上皮细胞表达峰值时间（第11天～13天）均在Bax表达峰值时间（分别为14天和15天）之前；Bax在小肠和结肠上皮细胞表达的表达峰值时间正是小肠和结肠细胞凋亡峰值出现的时间；P53在胎鼠胃、肠上皮细胞表达的峰值时间与Bcl-2表达的峰值时间一致，而与Bax表达峰值时间不一致。 结论 ①Bax在胎鼠四段消化管上皮细胞中的表达有时序差异。②细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2在胚胎消化管各段发育中的表达结果表明： Bcl-2可能具有抑制胎鼠消化管上皮细胞凋亡的作用；Bax可能具有促进细胞凋亡的作用。③P53在胚胎消化管各段发育中的表达结果显示，P53与胎鼠消化管上皮细胞凋亡调控的关系不密切。④Bcl-2 及Bax在食管上皮细胞表达的峰值时间与其凋亡峰值时间基本一致，而在小肠和结肠上皮细胞表达的峰值与其凋亡峰值时间不一致。这表明参与胎鼠食管和肠上皮细胞凋亡调控的机制可能不完全相同。胎鼠消化管发育过程中上皮细胞凋亡的调控机制，可能依赖于多种凋亡蛋白间的相互作用。
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2003
【分类号】：R321

【参考文献】

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本文编号：2652496