工频磁场对星形胶质细胞GJIC的影响

发布时间：2020-05-17 06:58

【摘要】： 背景与目的工频磁场的生物学效应，尤其是工频磁场对肿瘤发生发展的影响，是当前国际上热点问题。工频磁场对脑的影响研究较少。在流行病学调查方面，工频磁场辐射是否致脑肿瘤患病率增高尚有争议。有实验研究认为工频磁场可致脑细胞DNA单链、双链断裂率， DNA-DNA、DNA-蛋白交链形成率增高。近几年来，细胞间隙连接通讯（GJIC）的抑制被看作是检测可疑促癌剂的一个重要指标。本课题试图通过观察50Hz正弦交变磁场对SD大鼠大脑星形胶质细胞GJIC 的影响来研究工频磁场是否致脑肿瘤或协同其他促癌剂（如：佛波酯）致脑肿瘤。材料与方法1．实验分组：（1）空白对照组（0mT工频磁场）；（2）0.8mT 工频磁场处理组；（3）1.6mT工频磁场处理组：（4）TPA组：（5）0.8mT 工频磁场+TPA组；（6）1.6mT频磁场+TPA组。2．星形胶质细胞培养、鉴定：取生后3天内SD大鼠大脑组织，原代培养9天，传代一次，培养6天。采用免疫组织化学方法——SP法，用GFAP鉴定星形胶质细胞，星形胶质细胞阳性率达98％以上。3．星形胶质细胞处理：TPA 组细胞与3ng/ml TPA接触1小时；磁场辐射组细胞接受0.8mT或1.6mT、 50Hz正弦交变磁场暴露24小时；TPA+磁场辐射组细胞接受0.8mT或 1.6mT，50Hz正弦交变磁场辐射23小时后，加入3ng/ml TPA，再共同作用1小时。空白对照组置于假辐射器内24小时。4．FRAP法检测 GJIC：细胞经处理后，6-CFDA负载，然后在LSCM上用FRAP法检测。获取漂白前、后各次扫描图像，漂白细胞及校正细胞荧光强度的变化，并得出相应的时间－强度变化趋势图。5．SPSS10刀软件包做Kruskal 。lid W8lliS’S检验、Kefld。11’S等级相关检验，，O＜0．05表示有显著性差异。技果1．各处理组相对荧光强度恢复百分比（CFIRP）在漂白后omin为 0％，随扫描时间延长，CFIRP逐渐增高。空白对照组在漂白后10min时， CFIRP基本恢复至漂白前水平，所以选择漂白后10min时的相对荧光强度恢复速率（CFIRR）进行比较。同时随扫描时间延长，各处理组CFIRR 逐渐下降。2．TPA是一种己知强促癌剂，能抑制多种细胞的GJIC，其抑制效应与浓度、作用时间有关。本实验根据有关文献研究3ng／ml 1”PA作用1，J’时，结果得出：TPA浓度为3ng／ml时能够明显抑制星形胶质细胞 GJIC（CFIRRC。n；r。：：9．74；CFIRRTpA：4．53，H＝12，084， p＝0．00）。3．空白对照组、0．smT工频磁场处理组、1．6mT工频磁场处理组CFIRR 分别为：9．74、8．25、6．68。由上述数据可知，随着磁场强度的增强，CFIRR逐渐下降，呈负相关（，＝－0．180，p＝0刀32），说明工频磁场对 GJI的抑制作用随磁场强度（0～1．6mT范围内）增强呈递增趋势。但是 0．8或 1．6mT频磁场不能够抑制星形胶质细胞 GJIC （H—4．124，p—0．127，与空白对照组比较）。4．空白对照组、TPA组、 0．smT工频磁场＋TPA组、互．6mT频磁场＋TPA组 CFIRR分别为 9．74、 4．53、3．32、2．16。随着与TPA共同作用的工频磁场强度的增强，CFIRR 逐渐下降，呈负相关（T＝－0，338，p。0刀00）。0．smT或1石mT工频磁场与TPA（3ng／ml）共同作用能够抑制星形胶质细胞GJIC（H＝32石17， p－0．000，与空白对照组比较）。5．TPA、0．smTI频磁场＋TPA组、1．6mT 工频磁场＋TPA组CFIRR分别为4．53、3．32、2．16。0石mT或1．6mT工频磁场与TPA（3ng／ml）无协同增强对星形胶质细胞GJIC 抑制作用（H＝2．589，P＝0．274，与TPA组比较）。同时随着与TPA共同作用的工频磁场强度的增强，CFIRR逐渐下降，但是CFIRR下降等级相关性检验不具有统计学意义（，一0．136；p功．173人结论 2 l．FRAP法是评价可疑促癌剂对GJIC作用的简便而可靠的方法。 2．3nglml TPA作用 1，J’时，能够高度抑制星形胶质细胞 GJIC。 3．0．smT或1．6mT、50Hi正弦交变磁场单独辐射24 ，J’时不能抑制星形胶质细胞GJIC，协同TPA也不能增强对星形胶质细胞GJIC的抑制作用。但是磁场对星形胶质细胞GJIC的抑制作用随着磁场强度（0～1．6mT范围内）增强呈递增趋势。
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2001
【分类号】：R363;R730.2

【参考文献】