广西莱姆病病原分离及其分子生物学特征

发布时间：2020-05-27 15:19

【摘要】： 目的：从广西鼠类的膀胱中分离莱姆病螺旋体，并鉴定广西莱姆病 螺旋体的分子生物学特性及基因种。方法：无菌解剖野鼠，取其膀胱 组织标本接种于BSK-Ⅱ培养基中，33℃培养7-14天，暗视野观察。 将所分离的菌株制成抗原片，分别与单克隆抗体H5332，H6831， H9724反应及利用rrf-rrl间隔引物进行PCR扩增，其产物经MseⅠ， DraⅠ等限制性内切酶酶切后显示DNA多态性图谱进行鉴定其基因 种。结果：从广西雅长林场所捕获23只野鼠中共分离出6株莱姆病 螺旋体，分别命名为GXLD-4，8，9，16，，18，20，分离阳性率为 40％（6/15）。广西莱姆病螺旋体GXLD-4，18对上述单克隆抗体反应 各有不同：GXLD-4与H5332、H9724呈阳性反应，与H6831呈阴 性反应；GXLD-18和长14（贵州对比株）与H9724呈阳性反应，与 H5332、H6831均呈阴性反应。rrfA-rrlB（5s-23s）间隔区间扩增子使用 MseⅠ和DraⅠ进行RFLP分析，可见GXLD-4、GXLD-9、GXLD- 18、长14限制酶切图谱呈多态性和不典型性，不同于我国已有的四种 基因种的模式图。结论：首次从广西莱姆病宿主动物中分离出伯氏疏 螺旋体，从病原学上首次证实广西存在莱姆病。广西三株莱姆病螺旋 体单克隆抗体反应和基因分析呈多态性和不典型性，证明广西可能存 在多种莱姆病螺旋体基因种，有待进一步鉴定。
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2001
【分类号】：R377

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本文编号：2683727