NORPEG基因不同转录本在人睾丸中的表达研究

发布时间：2020-05-30 17:50

【摘要】：睾丸的精子发生是一个独特复杂的细胞分裂分化过程。睾丸生精小管中的生精细胞先后经过三个阶段的变化:精原细胞的增殖,精母细胞的减数分裂和精子细胞的变态过程,最终产生成熟的精子。在这一系列的形态学和生物学功能变化的背后是错综复杂的基因网络调控的过程。睾丸内复杂的基因表达调控一直是人们关注的热点,研究发现选择性剪接是在睾丸内转录水平控制基因表达的一种重要机制,对睾丸组织中的选择性剪接的深入研究有助于理解其基因表达调控的机制和蛋白的多样性。本研究在用睾丸cDNA芯片与成人、6月龄胚胎睾丸及精子cDNA探针杂交的基础上,鉴定了一条在人睾丸中表达的NORPEG基因(新的视网膜色素上皮细胞基因)的新转录本。因其比NORPEG短,因此命名为sNORPEG。此cDNA序列被输入到Genbank,登录号为AY317139。基因组比对显示,sNORPEG基因定位于5p13.2-13.3。sNORPEG的cDNA全长3486bp,开放阅读框长2952bp,编码大小为110.4KDa的蛋白质。氨基酸序列分析显示其含有六个锚蛋白重复序列和两个卷曲螺旋结构域,与人NORPEG蛋白及小鼠ankycorbin蛋白高度同源。研究表明NORPEG蛋白是一个和细胞骨架功能相关的蛋白,分布在视网膜色素上皮细胞胞质,研究发现小鼠ankycorbin蛋白分布在细胞与细胞之间粘着的部位,与细胞周边终末网的肌动蛋白丝结构相互关联,是一种与肌动蛋白功能相关的蛋白。RT-PCR实验结果显示sNORPEG在胚胎、成人睾丸和精子中均有表达,也在人多种组织中广泛表达。综上所述,sNORPEG是一条NORPEG基因的新转录本,在睾丸
【图文】：

胚胎,精子,差异表达,黑色

结果.1芯片杂交在成人和胚胎。DNA探针与争丸芯片杂交实验基础上，我们分离鉴了一个新的在胚胎和成人有差异表达的克隆。它在胚胎和成人争丸的杂交信号值分别为9.88和30.90，成人争丸中的信号强度比胚胎的高3.12倍(图3)。此外，它在精子中的杂交信号值为15.54，这明该基因在生精细胞中有表达。这是一条NORPEG基因短的不同转本，因此命名为sNORPEG。

精子,胚胎,阳性对照

1.3sNORpEG的脏器表达特异性Rl二PCR结果显示SNORPEG在胚胎争丸，成人争丸及精子中均有表达(图8)。也在人多种组织中广泛表达，在心，脑，胎盘，肺，肝，’肾，胰腺，脾，胸腺，辛丸，，卵巢，小肠，，结肠中都有表达，在骨骼肌有极微弱的表达，在前列腺，外周血白细胞未见表达，其中在肺和肇丸组织中检测到一条未知的片段，新片段经AT克隆测序后证实其为这条基因的一条新的EST(图9)。这条新的EST提交到NCBIEST数据库，其ESTid号为21253188。(图10)。
【学位授予单位】：南京医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2005
【分类号】：R346

【参考文献】