蜕膜及其它因子对滋养细胞侵入的影响及其与MAPK的关系

发布时间：2020-06-14 03:35

【摘要】： 目的 人类的成功妊娠需要来自胎儿的滋养层细胞对子宫基质的有节制地侵入。滋养细胞的侵入作用与其周围环境有着密切的联系，其中子宫蜕膜组织对其的影响尤为重要。先前研究表明，蜕膜细胞条件培养液(decidual cell conditioned media，DCM)能够阻止早孕滋养细胞的侵入，然而其具体机制尚未阐明。本研究首先观察DCM对早孕滋养细胞侵袭相关调节基因(包括MMPs、TIMP、uPA、PAI等)表达的影响，其次探讨细胞内MAPK信号通路对妊娠相关因子诱导早孕滋养细胞表达MMP-9的作用，最后进一步研究MAPK对人JAR细胞侵袭相关调节基因表达的作用，以及对其体外侵袭的影响。尽可能地弄清DCM的作用机制，以及MAPK是否参与了滋养细胞节制性侵入行为的调节。 方法 利用原代培养细胞技术培养人早孕滋养细胞、蜕膜细胞以及人JAR细胞系，制作DCM。用RT-PCR检测各基因表达的变化。用细胞ELISA法检测细胞内激酶活性。用Transwell细胞侵入系统检测细胞的体外侵袭作用；用MTT法评价细胞生长状况。 结果 1．早孕和晚孕DCM均能下调早孕滋养细胞MMP-2、MMP-9、uPAmRNA的表达，而上调TIMP-1mRNA的表达。早孕、晚孕DCM均能诱导滋养细胞PAI-1mRNA的表达，但对TIMP-2mRNA的表达未见有影响。 2．经IL-1β、TNF-α、PMA处理24h后，滋养细胞MMP-9基因表达显著增高，EGF对MMP-9基因表达仅见轻微的上调，而IL-10显著抑 制 MMP习基因的表达。我们发现 ILl6、TN’F化以及 PMA均能迅速激 活CTB细胞的ERK、lqK、p38激酶活性。上述因素刺激引起MMP习 mRNA表达显著增加，其能被ERK或p38的特异性抑制剂所抑制。 3．P啪诱导JAR细胞MMP上、MMP习、uPA mRNA表达显著增 加，其能被PD098059或SB203580所抑制，但存在差异性。PD098059 可明显抑制UMP－ZmRNA的表达。 p．PMA能促进人绒癌JAR细胞的体外侵袭作用，而p38特异性抑 制剂SB203580抑制了JAR细胞的侵袭能力。 结论 1．蜕膜细胞条件培养液可调节早孕滋养细胞侵袭相关基因的表达。 2．蜕膜细胞可能通过分泌某些因子激活或抑制细胞内MAPK信号 通路以调节滋养细胞MMP－2、MMP－9、TIMP－l、uPA、PAI－l等基因的 表达，从而影响滋养细胞的侵袭能力。 3．MAPK可能参与了滋养细胞多种侵袭相关基因表达的调控，其与 滋养细胞的侵袭行为有着密切关系。 【学位授予单位】：第一军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2002
【分类号】：R321

【图文】：

M人PK活性的影响，用细胞ELISA法检测滋养细胞中MAPK的相对激酶活性。结果显示，10nM、100nMPMA均能迅速激活ERK、JNK和p38。我们仅提供了JAR细胞中p38活性变化。(见图l)另外，我们还观察了p38MApK的选择性抑制剂SBZo358o对JAR细胞p38MA卫K激酶活性的影响，结果显示，SB203580可呈浓度依赖的方式抑制100nMPMA对p38MApK的激活。(见图2)

M人PK活性的影响，用细胞ELISA法检测滋养细胞中MAPK的相对激酶活性。结果显示，，10nM、100nMPMA均能迅速激活ERK、JNK和p38。我们仅提供了JAR细胞中p38活性变化。(见图l)另外，我们还观察了p38MApK的选择性抑制剂SBZo358o对JAR细胞p38MA卫K激酶活性的影响，结果显示，SB203580可呈浓度依赖的方式抑制100nMPMA对p38MApK的激活。(见图2)

【引证文献】

相关博士学位论文 前1条

1 张曦倩;ERK信号传导通路在滋养层细胞侵袭过程中的作用[D];第一军医大学;2005年

本文编号：2712211