慢病毒介导B7-2基因RNA干扰对小鼠树突状细胞诱导T细胞增殖的影响
【部分图文】：
0、20、40、60时感染效率分别为7.1%、25.3%、62.2%、72.8%及86.4%。2.5重组B7-2基因ＲNAi慢病毒感染对DC表面B7-2表达的沉默效果分析参照阴性对照慢病毒对DC的感染效率，重组慢病毒LV-139、LV-425、LV-848及LV-NC以MO为80感染DC及培养72h，流式分析各组重组慢病毒对DC表面B7-2的干扰效率，结果显示(图7):感染效率进一步提高至90%以上，LV-139、LV-425、LV-848感染后DC表面B7-2分子的表达率分别下降至4.3%、3.8%和6.3%，而图1小鼠B7-2ＲNAi重组慢病毒表达载体测序结果Fig．1DNAsequencingofrecombinantlentiviralvectorspecificformouseB7-2ＲNAi·241·中国免疫学杂志2019年第35卷
图2慢病毒包装过程中GFP的表达(48h，×100)Fig．2GFPexpressioninlentiviruspackagingprogress(48h，×100)图3重组慢病毒滴度测定(×100)Fig．3Titrationofrecombinantlentivirus(×100)图4体外培养的小鼠骨髓源DC形态的变化(×400)Fig．4MorphologicalchangesofmouseBM-DCsinprogressofcultureinvitro(×400)图5小鼠骨髓源DC的表型分析Fig．5PhenotypicanalysisofmouseBM-DCsLV-NC感染组B7-2分子表达率无明显变化(73.2%vs71.0%)。根据以上结果确定LV-425为具有最佳干扰效果的小鼠B7-2基因ＲNAi重组慢病毒。2.6重组B7-2基因ＲNAi慢病毒感染及沉默DC表面B7-2表达对DC免疫性能的影响收获LPS刺激成熟和经LV-425或LV-NC感染的DC作为刺激细胞，以小鼠脾脏T细胞作为反应细胞，二者比例为1∶10进行混合淋巴细胞反应，共培养72h孔永等慢病毒介导B7-2基因ＲNA干扰对小鼠树突状细胞诱导T细胞增殖的影响第2期·341·
图2慢病毒包装过程中GFP的表达(48h，×100)Fig．2GFPexpressioninlentiviruspackagingprogress(48h，×100)图3重组慢病毒滴度测定(×100)Fig．3Titrationofrecombinantlentivirus(×100)图4体外培养的小鼠骨髓源DC形态的变化(×400)Fig．4MorphologicalchangesofmouseBM-DCsinprogressofcultureinvitro(×400)图5小鼠骨髓源DC的表型分析Fig．5PhenotypicanalysisofmouseBM-DCsLV-NC感染组B7-2分子表达率无明显变化(73.2%vs71.0%)。根据以上结果确定LV-425为具有最佳干扰效果的小鼠B7-2基因ＲNAi重组慢病毒。2.6重组B7-2基因ＲNAi慢病毒感染及沉默DC表面B7-2表达对DC免疫性能的影响收获LPS刺激成熟和经LV-425或LV-NC感染的DC作为刺激细胞，以小鼠脾脏T细胞作为反应细胞，二者比例为1∶10进行混合淋巴细胞反应，共培养72h孔永等慢病毒介导B7-2基因ＲNA干扰对小鼠树突状细胞诱导T细胞增殖的影响第2期·341·
【参考文献】
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1 谢金敏;包杰;董瑞强;杨明;温浩;;RelB shRNA慢病毒感染小鼠骨髓树突状细胞的免疫学效应[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年53期
【共引文献】
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1 谢金敏;汪艳;包杰;马永革;邹志浩;唐增杰;董瑞强;温浩;;预输注RelB shRNA慢病毒修饰树突细胞诱导大鼠肝移植免疫耐受[J];中国组织工程研究;2012年53期
【二级参考文献】
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2 包杰;郑磊;王前;熊石龙;裘宇容;曾方银;李娟;;RelB shRNA慢病毒感染小鼠骨髓树突细胞的免疫学效应观察[J];解放军医学杂志;2009年09期
3 包杰;王前;郑磊;曾方银;刘杰;熊石龙;裘宇容;李娟;;小鼠RelB基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定[J];解放军医学杂志;2007年06期
4 包杰;郑磊;王前;顾春瑜;裘宇容;李娟;;小鼠骨髓成熟与不成熟树突状细胞中RelB基因的表达[J];细胞与分子免疫学杂志;2006年06期
5 包杰;王前;郑磊;顾春瑜;曾方银;裘宇容;杨春莉;李娟;;小鼠骨髓成熟与未成熟树突状细胞的生物免疫学功能比较研究[J];中华风湿病学杂志;2007年02期
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2 仇素英;慢病毒感染[J];山东医学院学报;1979年03期
3 黄传书;肿瘤坏死因子α对抗原和有丝分裂原诱导T细胞增殖的增强作用[J];国外医学(免疫学分册);1989年02期
4 闻玉梅;慢病毒感染(综述)[J];国外医学参考资料.流行病学传染病学分册;1977年04期
5 贾琴;张玉英;吴爽;李艳萍;;B7-2基因联合自杀基因治疗乳腺癌移植瘤模型[J];解剖学研究;2017年01期
6 白维仁;;慢病毒感染与免疫的关系[J];医师进修杂志;1986年05期
7 刘玉华;孙杰;陈明心;郭静雅;胡玲玲;王艳茹;陈昌友;高增燕;朱晓燕;邱玉华;;B7-2基因工程抗体的制备及体内外抗B淋巴瘤作用研究[J];中山大学学报(自然科学版);2010年03期
8 沈立军;孔永;王婧;朱莹;蔡磊;朱玉强;沈辉;邱玉华;;抗人B7-1及B7-2双特异性抗体的构建、表达及与抗原结合的特性分析[J];中国免疫学杂志;2015年07期
9 王文阁,葛伟文,贺福初,吴祖泽;小鼠免疫共刺激信号B7-2 cDNA的克隆与序列测定[J];中国免疫学杂志;1997年01期
10 包杰;郑磊;王前;熊石龙;裘宇容;曾方银;李娟;;RelB shRNA慢病毒感染小鼠骨髓树突细胞的免疫学效应观察[J];解放军医学杂志;2009年09期
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本文编号：2845144
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