青藤碱通过抑制缺血诱导的异常自噬缓解MCAO模型大鼠脑损伤

发布时间：2020-10-18 21:21

　　 目的:探究青藤碱(SM)对脑中动脉阻塞(MCAO)大鼠脑缺血损伤的作用及机制。方法:线栓法复制大鼠MCAO模型,TTC染色检测脑梗死面积,免疫组化和Western blot检测增殖、凋亡及自噬标记蛋白的表达,ELISA检测脂质过氧化物及炎症因子的含量。结果:SM能显著减少MCAO大鼠脑梗死面积;免疫组化及Western blot结果显示,SM能明显促进MCAO大鼠增殖标记蛋白Ki67及凋亡标记蛋白Bcl-2的表达,降低Caspase-3和Bax表达水平。同时,SM还能明显降低MCAO大鼠血清脂质过氧化物(LDH、MDA)及炎症因子(NO、IL-6)的含量。此外,SM可明显抑制MCAO大鼠自噬标记蛋白Beclin1表达,降低LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值,促进p62的表达。SM处理后还能显著抑制m TOR/Ulk1通路蛋白Ulk1表达,升高m TOR表达水平。结论:SM可通过m TOR/Ulk1通路抑制缺血诱导的异常自噬,从而缓解MCAO大鼠脑缺血损伤。
【部分图文】：

ymphoma2，Bcl-2)的表达，促进Caspase-3和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2asso-ciatedXprotein，Bax)的表达(P＜0.01，P＜0.001，图3);SM能显著诱导MCAO大鼠脑组织Ki67和Bcl-2的表达，降低Caspase-3和Bax的表达水平(P＜0.05，P＜0.01，图3)。2.3SM对MCAO大鼠神经炎症及脂质过氧化的影响ELISA实验结果表明，缺血缺氧能明显诱导大鼠血清LDH、MDA、NO和IL-6的分泌(P＜0.01，图4);SM可显著降低MCAO大鼠血清LDH、MDA、图1SM对MCAO大鼠脑梗死的影响Fig．1EffectofSMoncerebralinfractionofMCAOratsNote:A.ThechemicalstructureofSM;B.TheareaofcerebralinfractionwasdeterminedbyTTCstaining.＊＊.P＜0.01versusHealthycontrolgroup，#.P＜0.05versusMCAOgroup.·24·中国免疫学杂志2019年第35卷

NO和IL-6的含量(P＜0.05，图4)。2.4SM对MCAO大鼠异常自噬及自噬通路的影响为了探究SM缓解MCAO大鼠缺血损伤的机制，我们检测了自噬标记蛋白及自噬相关通路蛋白的表达情况。与HealthyControl比较，MCAO组大鼠脑组织Beclin1表达水平和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值明显升高，p62表达水平明显降低(P＜0.001，图5);与MCAO组比较，MCAO+SM组大鼠脑组织Beclin1图2SM对MCAO大鼠脑细胞增殖及凋亡的影响Fig．2EffectsofSMoncellproliferationandapoptosisofratsNote:ImmunohistochemicalwasperformedforexpressionsofKi67andCaspase-3.＊＊.P＜0.01versusHealthycontrolgroup，#.P＜0.05versusMCAOgroup.Allexperimentswererepeatedatleastthreetimes.图3SM对MCAO大鼠脑组织增殖及凋亡标记蛋白表达的影响Fig．3EffectsofSMonproliferation-andapoptosis-relat-edproteinsofMCAOratsNote:WesternblotwasemployedtodeterminetheproteinlevelsofKi67，Caspase-3，Bcl-2andBax.＊＊.P＜0.01，＊＊＊.P＜0.001versusHealthycontrolgroup，#.P＜0.05，##.P＜0.01versusMCAOgroup.GAPDHwasusedasloadingcontrol.表达水平和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值明显降低，p62表达水平明显升高(P＜0.05，P＜0.01，图5)。此外，缺血能明显抑制雷帕霉素靶蛋白(mammaliantargetofrapamycin，mTOＲ)的表达，促进Ulk1的表达(P＜0.01，P＜0.001，图5);SM能显著缓解缺血对mTOＲ表达的抑制作用及对Ulk1表达的促进作用(P＜0.05，图5)。图4SM对MCAO大鼠神经炎症及脂质过氧化的影?

?HealthyControl比较，MCAO组大鼠脑组织Beclin1表达水平和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值明显升高，p62表达水平明显降低(P＜0.001，图5);与MCAO组比较，MCAO+SM组大鼠脑组织Beclin1图2SM对MCAO大鼠脑细胞增殖及凋亡的影响Fig．2EffectsofSMoncellproliferationandapoptosisofratsNote:ImmunohistochemicalwasperformedforexpressionsofKi67andCaspase-3.＊＊.P＜0.01versusHealthycontrolgroup，#.P＜0.05versusMCAOgroup.Allexperimentswererepeatedatleastthreetimes.图3SM对MCAO大鼠脑组织增殖及凋亡标记蛋白表达的影响Fig．3EffectsofSMonproliferation-andapoptosis-relat-edproteinsofMCAOratsNote:WesternblotwasemployedtodeterminetheproteinlevelsofKi67，Caspase-3，Bcl-2andBax.＊＊.P＜0.01，＊＊＊.P＜0.001versusHealthycontrolgroup，#.P＜0.05，##.P＜0.01versusMCAOgroup.GAPDHwasusedasloadingcontrol.表达水平和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值明显降低，p62表达水平明显升高(P＜0.05，P＜0.01，图5)。此外，缺血能明显抑制雷帕霉素靶蛋白(mammaliantargetofrapamycin，mTOＲ)的表达，促进Ulk1的表达(P＜0.01，P＜0.001，图5);SM能显著缓解缺血对mTOＲ表达的抑制作用及对Ulk1表达的促进作用(P＜0.05，图5)。图4SM对MCAO大鼠神经炎症及脂质过氧化的影响Fig．4EffctsofSMonneuroinflammationandlipidper-oxidationNote:TheconcentrationsofserumLDH，MDA，NOandIL-6weremeas-uredbyELISAassay.＊＊.P＜0.01versusHealthycontrolgroup，#.P＜0.0
【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 尹晓刚;邓倩;潘瑞华;陈世东;;青藤碱通过抑制缺血诱导的异常自噬缓解MCAO模型大鼠脑损伤[J];中国免疫学杂志;2019年01期

2 赵静;刘伟伟;李雪萍;高永翔;;青藤碱对佐剂诱导性关节炎模型大鼠炎症相关因子表达的影响[J];重庆医学;2018年07期

3 刘东平;青藤碱的研究进展[J];安徽医药;2005年11期

4 张宁,徐莲英,徐培康,钟高仁;~(125)I-青藤碱大鼠经皮渗透试验研究[J];中药材;2002年06期

5 秦国庆;王毅;姜黎明;罗志刚;李建军;;青藤碱对肾移植模型大鼠外周血淋巴细胞穿孔素表达水平的影响[J];医学临床研究;2006年11期

6 刘强,周莉玲,李锐;青藤碱的研究概况[J];中草药;1997年04期

7 朱昱豪;谭梅傲;佘世锋;兰绍阳;曹敏;梁艺;;青藤碱通过免疫调节防护刀豆蛋白A诱导的大鼠急性免疫性肝损伤[J];广州中医药大学学报;2018年03期

8 刘启德，梁美蓉，欧卫平，叶少梅，冯美蓉，王宁生;青藤碱时辰药代动力学研究[J];中药新药与临床药理;1995年01期

9 抗晶晶;刘晓宁;;青藤碱抗炎作用的新进展[J];中国野生植物资源;2017年06期

10 张转平,朱朝德,高海,王宏涛,孙文基;青风藤中青藤碱的含量考察[J];西北药学杂志;1998年06期

相关博士学位论文 前10条

1 吕兴华;青藤碱上调microRNA-124对小鼠肾缺血再灌注损伤保护效应的研究[D];兰州大学;2018年

2 张英丰;微透析法进行青藤碱贴剂透皮特性及药物动力学的研究[D];广州中医药大学;2006年

3 程维明;青风藤化学成分及青藤碱大鼠体内代谢研究[D];沈阳药科大学;2005年

4 张立;青藤碱对实验性糖尿病大鼠肾脏保护作用机制的研究[D];吉林大学;2007年

5 白方会;正天丸和川芎嗪对偏头痛模型大鼠三叉神经血管系统神经递质表达的影响[D];南方医科大学;2016年

6 顿晶晶;补肾中药更康颗粒的药效学及急性毒理实验研究[D];广州中医药大学;2016年

7 王跃旗;枫寥肠胃康对腹泻型肠易激综合征大鼠结肠动力及氯离子分泌的影响[D];北京中医药大学;2017年

8 穆道周;芍药苷抗抑郁促动力作用的实验研究[D];南京中医药大学;2016年

9 杨贞;益气血法通过调节GDF9分泌对大鼠超排卵卵丘细胞凋亡的影响及其作用机制研究[D];广州中医药大学;2017年

10 曾玉群;大黄及其活性物质灌肠对慢性肾脏病模型大鼠作用的分子机制[D];广州中医药大学;2017年

相关硕士学位论文 前10条

1 周国胜;青藤碱对三硝基苯磺酸诱导的实验性大鼠结肠炎作用及其作用机制的研究[D];安徽医科大学;2009年

2 王朋;青藤碱对大鼠肾脏缺血再灌注时HIF-1α和VEGF表达的影响[D];兰州大学;2016年

3 孙越华;青藤碱的镇痛作用及其机制研究[D];南通大学;2016年

4 董琪;青藤碱与艾拉莫德对胶原诱导关节炎的时间治疗学研究[D];华北理工大学;2018年

5 熊力群;基于TLR2、TLR4基因沉默探索青藤碱对小鼠DC2.4炎性因子表达的影响[D];成都中医药大学;2018年

6 徐芳;青藤碱对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用[D];锦州医科大学;2018年

7 李文龙;青藤碱对DC2.4细胞TLR2/TLR4-MyD88/TRIF信号通路的影响[D];成都中医药大学;2017年

8 晋小荣;青藤碱对DC2.4 JAK/STAT信号通路磷酸化的影响[D];成都中医药大学;2017年

9 张悦阳;青藤碱对乳腺癌细胞诱导的骨破坏的影响和分子免疫机制研究[D];南方医科大学;2017年

10 吴玉;青藤碱对戊四氮致痫大鼠海马神经元的保护作用及机制研究[D];安徽医科大学;2017年

本文编号：2846831