稀土标记物固相时间分辨荧光免疫检测体系研究

发布时间：2021-02-20 22:30

　　利用稳定的稀土标记物BHHCT-Eu3+、BPTA-Tb3+和铕纳米颗粒建立夹心型固相时间分辨荧光免疫分析（TrFIA）直接定量测定乙肝表面抗原（HBsAg）的新方法。结果表明，使用BHHCT-Eu3+-HBsAb、BHHCT-Eu3+-SA-BSA、BPTA-Tb3+-SA和铕纳米颗粒-HBsAb四种标记物的最低检出限分别为0． 2 ng／mL、0． 05 ng／mL、0． 06 ng／mL和0． 03 ng／mL，标准曲线范围为0-100 ng／mL（BPTA-Tb3+-SA的为0-50 ng／mL）。采用相同的抗原和抗体，ELISA的最低检出限为0． 5 ng／mL，标准曲线范围为0-10 ng／mL，说明稀土标记物TrFIA具有明显提高的定量检测能力。四种标记物检测标准样品或血清样品的批内变异系数CV均小于10％，后三种检测阳性血清的回收率为85％-110％。使用铕纳米颗粒标记物的TrFIA和ELISA两种方法同时定量检测31份HBsAg阳性血清，两者的相关系数达0． 98。另外，以磁性微球作为免疫反应的固相，铕纳米颗粒作为标记物，建立起固相磁分离TrFIA定量测定HBsAg的... 

【文章来源】：厦门大学福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
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英文摘要
一 前言
    （一） 稀土络合物的特点
    （二） 时间分辨荧光分析法的原理
    （三） 时间分辨荧光分析法的应用
    （四） 稀土络合剂的分类及主要TrFIA系统
二 材料与方法
    （一） 材料
        1 主要材料与试剂
        2 溶液配置
        3 主要仪器
    （二） 方法
        1 铕和铽络合物用于HBsAg的时间分辨荧光免疫检测
            1. 1 BHHCT-Eu3+-HBsAb的制备
            1. 2 BHHCT-Eu3+-SA-BSA的制备
            1. 3 羊抗人HBsAb的生物素化
            1. 4 BHHCT-Eu3+-HBsAb-TrFIA 测定HBsAg
            1. 5 BHHCT-Eu3+-SA-BSA-TrFIA测定HBsAg
            1. 6 BPTA-Tb3+-SA-TrFIA测定HBsAg
        2 铕纳米颗粒超高灵敏时间分辨荧光免疫检测HBsAg
            2. 1 铕纳米颗粒-HBsAb复合物的制备
            2. 2 铕纳米颗粒-HBsAb-TrFIA测定HBsAg
        3 磁分离时间分辨荧光免疫检测HBsAg的新方法
            3. 1 磁性微球．HBsAb复合物的制备
            3. 2 磁分离时间分辨荧光免疫检测HBsAg的新方法
三 结果与讨论
    1 铕和铽络合物用于HBsAg的时间分辨荧光免疫检
        1. 1 BHHCT和BPTA的性质
        1. 2 BHHCT-Eu3+-HBsAb-TrFIA测定HBsAg
        1. 3 BHHCT-Eu3+-SA-BSA-TrFIA测定HBsAg
        1. 4 BPTA-Tb3+-SA-TrFIA测定HBsAg
        结论
    2 铕纳米颗粒超高灵敏时间分辨荧光免疫检测HBsAg
        2. 1 铕纳米颗粒的性质
        2. 2 铕纳米颗粒-HBsAb-TrFIA测定HBsAg
        结论
    3 磁分离时间分辨荧光免疫检测HBsAg的新方法
        3. 1 磁性微球的性质
        3. 2 磁分离时间分辨荧光免疫检测HBsAg的新方法
        结论
四 展望
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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[2]斑点金免疫渗滤法快速检测乙肝表面抗原[J]. 纪爱芳,郭进军,郭止不.  长治医学院学报. 2000(01)
[3]掺杂TiO2光催化膜材料的制备及其灭菌机理[J]. 刘平,林华香,付贤智,孟春.  催化学报. 1999(03)
[4]热敏相分离荧光免疫分析乙肝表面抗原的新方法[J]. 朱庆枝,杨黄浩,李东辉,许金钩,张毅,张长弓.  高等学校化学学报. 1999(04)
[5]免疫磁性制剂的研究[J]. 徐敏,姜丽丽.  药学进展. 1999(01)
[6]荧光共振能量转移技术在生物分析中的应用[J]. 魏亦男,李元宗,常文保,慈云祥.  分析化学. 1998(04)
[7]胶体金免疫层析法检测乙型肝炎病毒表面抗原[J]. 周继文,戎广亚,杨守纯,张建宗,程云,任继明.  中华医学检验杂志. 1998(01)
[8]乙肝表面抗原固相放免定量药盒的特性[J]. 徐哲,孔繁信.  同位素. 1997(03)
[9]时间分辨荧光分析法在DNA探针检测中的初步应用[J]. 游冬青,陈杞,张丽民,贺广彩,邹鲁峰,陈克明.  生物化学杂志. 1997(02)
[10]时间分辨荧光核酸杂交分析体系的建立及其初步应用[J]. 游冬青,陈杞,张丽民,贺广彩,韩玲,邹鲁峰,陈克明.  第二军医大学学报. 1996(04)



本文编号：3043436