Lck-Cre×Perp flox/flox 条件敲除小鼠的繁育及基因型鉴定

发布时间：2021-02-22 03:04

　　目的制备Cre-LoxP重组酶系统调控下的T淋巴细胞Perp基因条件性敲除的纯合子小鼠并进行鉴定,为进一步在整体动物水平研究Perp基因在T细胞发育以及在自身免疫疾病发病中的作用提供研究平台。方法将引进的Perp条件敲除小鼠和T淋巴细胞特异性表达Cre重组酶的Lck-Cre小鼠分别进行繁殖和鉴定,然后将两种小鼠进行杂交并对其子代小鼠的基因型进行鉴定,其子代基因型为Lck-Cre×Perpflox/flox的小鼠即为本实验所构建的T细胞Perp基因特异性敲除的纯合子小鼠。结果 Lck-Cre×Perpflox/flox的纯合子小鼠被繁殖成功并准确鉴定。Lck-Cre×Perpflox/flox小鼠脾脏CD3+细胞的Perp基因的RNA及蛋白表达水平与Lck-Cre×Perp+/+小鼠相比显著降低。结论本研究利用Cre-LoxP技术成功构建了T细胞特异性敲除Perp基因的纯合子小鼠,为进一步研究Perp基因在T淋巴细胞发育以及自身免疫性疾病发病中的作用提供了优良的工具。 

【文章来源】：成都医学院学报. 2014,9(02)

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验材料
        1.1.1实验动物
        1.1.2主要实验试剂
    1.2 实验方法
        1.2.1 Perp条件基因敲除小鼠的建立
        1.2.2聚合酶链反应（PCR）及水平电泳
        1.2.3 qPCR以及Western Blot检测Perp表达水平
    1.3 统计学方法
2 结果
    2.1 Perpflox小鼠的繁殖、生长及鉴定
    2.2 表达Cre重组酶小鼠的繁殖、生长及鉴定
    2.3 Lck-Cre×Perpflox/flox小鼠脾脏T细胞中Perp的表达水平
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]Conditional gene manipulation:Cre-ating a new biological era[J]. Jian ZHANG,Jing ZHAO,Wen-jie JIANG,Xi-wei SHAN,Xiao-mei YANG,Jian-gang GAO(School of Life Science,Shandong University,Jinan 250100,China).  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2012(07)
[2]条件基因打靶研究存在的主要问题及对策[J]. 林福玉,杨晓.  遗传. 2011(05)



本文编号：3045346