Fas配体胞外区的克

发布时间：2021-02-27 06:49

　　[背景]保守、通用的遗传密码决定了所有有机体中所有蛋白质的氨基酸序列。然而，这个密码不足以提供能明确这些蛋白质三维结构和功能的相关信息。研究表明由互补的核酸序列编码的有义肽和反义肽之间存在特殊的相互作用，由此就提出了有第二套二维的遗传密码即蛋白密码的存在。M-I（Mekler-Idlis）配对理论，提出了有义肽中密码子编码的氨基酸残基可与相应的互补肽中密码子编码的残基发生特定的两两相互作用。AHBs（反义同源盒）理论和分子识别理论描述了蛋白分子内和蛋白分子间可以特异结合的区域结构具有正义与反义的关系。受体与配体的相互作用实质上是蛋白质分子间的识别、结合和相互作用的过程。将受体看作是有义肽，那么可与之特异结合的配体分子中可能存在一段或多段反义肽，而且其存在的部位是配体功能的关键位置。Fas（APO-1，CD95）属于肿瘤坏死因子超家族之一员，是Fas配体（FasL）的受体。当它的配体FasL与之结合后，可以引起表达Fas的细胞发生凋亡。本研究依据AHBs理论，应用自行编写的软件，在FasL分子中寻找到与Fas相应的反义多肽最为接近的十肽结构即FasL_256-265（... 

【文章来源】：中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校

【文章页数】：82 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

375细胞mRNA鉴定

MD一11a质粒进行连接反应，转化新鲜制备的K802感受态菌，涂布于含Amp的平板上，将转化平板上生长出的转化子进行鉴定。挑取分离良好的菌落先进行菌落PCR以初步筛选，见图4一1。选初步筛选为阳性重组子的细菌抽提质粒，以Ndel和BamHI双酶切鉴定，获得含有FasL基因的重组质粒，命名为pMD一1ST一FasL一ECD，酶切鉴定的电泳结果如图4一2所示。50ObPFasL一ECD引物二聚体12345图4一1重组K802一pMD一FasL菌的PCR鉴定l泳道为DNAMarker:LambdaDNA/EeoRI+Hind1112一5泳道为KsoZ一pMD一FasL菌的peR产物PMD一1ST500bPFaSL一ECD12345图4一2重组KsoZ一pMD一FasL菌的酶切鉴定l泳道为nNAMarker:LambdanNA/EcoRI+HindIxx2一5泳道为分别为图3一1中所对应的重组质粒的酶切产物，其中2泳道为空质粒

MD一11a质粒进行连接反应，转化新鲜制备的K802感受态菌，涂布于含Amp的平板上，将转化平板上生长出的转化子进行鉴定。挑取分离良好的菌落先进行菌落PCR以初步筛选，见图4一1。选初步筛选为阳性重组子的细菌抽提质粒，以Ndel和BamHI双酶切鉴定，获得含有FasL基因的重组质粒，命名为pMD一1ST一FasL一ECD，酶切鉴定的电泳结果如图4一2所示。50ObPFasL一ECD引物二聚体12345图4一1重组K802一pMD一FasL菌的PCR鉴定l泳道为DNAMarker:LambdaDNA/EeoRI+Hind1112一5泳道为KsoZ一pMD一FasL菌的peR产物PMD一1ST500bPFaSL一ECD12345图4一2重组KsoZ一pMD一FasL菌的酶切鉴定l泳道为nNAMarker:LambdanNA/EcoRI+HindIxx2一5泳道为分别为图3一1中所对应的重组质粒的酶切产物，其中2泳道为空质粒

【参考文献】：
期刊论文
[1]膜蛋白Fas及其配体FasL系统与病毒感染[J]. 马本江,杭长寿.  中华实验和临床病毒学杂志. 2001(01)
[2]Fas系统研究进展[J]. 朱锡华.  中华微生物学和免疫学杂志. 1996(02)



本文编号：3053851