oxLDL和oxHDL对C57BL/6J小鼠骨髓源性树突状细胞趋化作用和成熟活化的影响

发布时间：2021-04-03 02:09

　　目的树突状细胞（dendritic cells, DCs）是体内唯一能够激活初始T细胞的抗原提呈细胞,它是免疫反应的枢纽。动脉粥样硬化（atherosclerosis,As）是一种脂质相关的慢性免疫炎症性疾病。近年来研究显示,DCs可能影响As的起始和进展。已证明多种与As相关的抗原物质可诱导DCs的成熟,而DCs的成熟是其作用完全发挥的必要条件。本实验从C57BL/6J小鼠骨髓中分离培养DCs,研究LDL和HDL发生氧化后,对DCs趋化作用和成熟活化的影响;确定oxLDL和oxHDL作为自身抗原,引起DCs的迁移和成熟活化,导致局部的免疫反应和As的起始。方法颈椎脱位法处死C57BL/6J小鼠,取股骨和胫骨,剔除周围肌肉,离断干骺端后,用注射器吸取RPMI-1640培养液冲洗骨髓腔,获得单细胞悬液。利用动物树突状细胞专用分离液和细胞黏附性差异去除大部分巨噬细胞和淋巴细胞,用rmGM-CSF和rmIL-4诱导单个核细胞向DCs分化,并抑制淋巴细胞生长。隔天半量换液,补足所需细胞因子和培养液,培养至第7天,轻轻吹打收获,即为未成熟的骨髓源性树突状细胞（bonemarrow derived... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

LDL、oxLDL、HDL、oxHDL琼脂糖凝胶电泳LDL、HDL在含200μm/LCuSO4的PBS中，于37℃氧化至颜色由橙黄色转变为乳白色，0.8％

图 2：BMDCs 普通光镜（10×）、HE 染色（100×）和扫描电镜：图 A，培养至第 3 天的骨髓细胞；图 B，培养至第 7 天未成熟的l LPS 刺激成熟的 BMDCs；图 D，未成熟的 BMDCs。扫描电镜：DCs；图 F，未成熟的 BMDCs。光染色小鼠 DCs 特有分子标志 33D1 和成熟分子标志 CD

图 3：33D1 和 CD11c 免疫荧光染色（FITC，20×）1、1a 分别是同一视野内 BMDCs 及其 33D1 免疫荧光染色；2、2a 分别是同一视野内 LPS 刺激后的 BMDCs 及其 33D1 免疫荧光染色；3、3a 分别是同一视野内 BMDCs 及其 CD11c 免疫荧光染色；4、4a 分别是同一视野内 LPS 刺激后的 BMDCs 及其 CD11c 免疫荧光染色。 oxLDL 和 oxHDL 对 BMDCs 的趋化作用


本文编号：3116405