幽门螺杆菌KatA及KatA与大肠杆菌LTB融合蛋白的表达研究

发布时间：2021-04-10 02:42

　　幽门螺杆菌 （Helicobacter pylori, Hp） 的高感染率及其严重的危害性,使Hp疫苗成为医学微生物领域研究的热点之一，为探讨过氧化氢酶（Catalase, KatA）作为基因工程疫苗候选抗原在防治Hp 感染中的作用，本研究采用PCR方法从Hp临床分离株中克隆katA基因（katA），构建Hp过氧化氢酶高效表达载体，并对重组工程菌的表达条件进行优化；重组蛋白KatA（rKatA）经镍离子亲和层析纯化后，以Western blot、ELISA及动物实验检测其免疫学活性。在此基础上，进一步采用重叠延伸技术将大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位（E. coli heat-labile enterotoxin B subunit, LTB）基因（ltB）和katA基因以不同次序进行融合并分别在大肠杆菌中进行表达，筛选较理想的KatA-LTB融合蛋白表达载体，以期获得既具有免疫学活性又具有粘膜佐剂活性的KatA-LTB融合蛋白，为进一步研制Hp分子内佐剂亚单位疫苗奠定基础。全文结果与结论如下：1．采用PCR技术分别从我国临床分离的Hp菌株及国际标准菌株NCTC11637中克隆了Hp ka... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：95 页

【学位级别】：硕士

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英文摘要
论文正文：幽门螺杆菌KatA及KatA与大肠杆菌LTB融合蛋白的表达研究
    前言
    第一部分 幽门螺杆菌过氧化氢酶的基因克隆、表达及免疫学活性研究
        第一节 幽门螺杆菌过氧化氢酶的基因克隆、表达
            实验材料
            实验方法
            结果
        第二节 幽门螺杆菌过氧化氢酶的高效表达与纯化
            实验材料
            实验方法
            结果
        第三节 重组蛋白的免疫学活性研究
            实验材料
            实验方法
            结果
        讨论
    第二部分 幽门螺杆菌KatA与大肠杆菌LTB融合蛋白的表达
        实验材料
        实验方法
        结果
        讨论
    全文总结
    参考文献
文献综述 自由基损伤在幽门螺杆菌相关胃病中的作用
    参考文献
致谢
攻读硕士期间撰写的文章


【参考文献】：
期刊论文
[1]huIL-6-GM-CSF（9-127）融合蛋白的表达及活性测定[J]. 孙强明,戴长柏,李洪钊,丁云菲,马雁冰,刘红岩,徐维明.  免疫学杂志. 2002(04)
[2]幽门螺杆菌感染患者胃液及血浆中维生素C含量的变化[J]. 张志广,闻淑军,卢向东,王洪礼.  天津医药. 2002(01)
[3]抗氧化干预对肝癌细胞增殖及N-ras基因表达的作用[J]. 刘珊林,施冬云,潘喜华,申宗侯.  生物化学与生物物理学报. 2001(04)
[4]幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位基因工程菌的发酵[J]. 王缚鲲,张卫军,邹全明,郭学青,于长青,曾浩.  中国生物制品学杂志. 2001(02)
[5]幽门螺杆菌重组粘附素rHpaA生物学活性及免疫原性的体外评价[J]. 陈烨,王继德,施理,张兆山,周殿元.  中华医学杂志. 2001(05)
[6]锌7-金属硫蛋白对过氧化氢引起的NIH3T3细胞增殖的抑制作用[J]. 仲崇霞,葛淑君,程时,陶家平.  基础医学与临床. 2000(06)
[7]超氧阴离子自由基促肝卵圆细胞株WB-F344增殖、转化作用的研究[J]. 李芸,廖钢陵,邓建籽,吴元德.  中国医学科学院学报. 2000(02)
[8]幽门螺杆菌:细胞增殖和细胞凋亡在胃癌发生中的作用[J]. 华杰松.  世界华人消化杂志. 1999(08)
[9]幽门螺杆菌提取液诱发大鼠胃癌前病变及维生素C的拮抗作用[J]. 梁后杰,刘为纹,房殿春,门荣甫,王俊茹,周子成.  解放军医学杂志. 1996(06)



本文编号：3128797