真核双表达载体pIRES-hVEGF 121 /hBMP-4的构建与鉴定

发布时间：2021-04-21 19:05

　　目的构建含有人血管内皮生长因子（human Vascular endothelial growth factor,hVEGF121）和人骨形态发生蛋白-4（human Bone morphogenesia protein-4,hBMP-4）两基因的真核双表达质粒,并鉴定。方法首先将hVEGF121通过定向克隆至真核双表达质粒pIRES一个多克隆位点中,命名为pIRES-hVEGF121。再将hBMP-4定向克隆至穿梭质粒pShuttle CMV上,构建pShuttle CMV-hBMP-4重组穿梭质粒,最后通过重组穿梭质粒将hBMP-4定向克隆至真核双表达质粒pIRES-hVEGF121上,完成真核双表达载体pIRES- hVEGF121/hBMP-4的构建,并作酶切鉴定。转染COS-7细胞,提取总RNA和总蛋白,分别进行RT-PCR检测其转录和Western blot检测其蛋白表达。结果酶切证明pIRES-hVEGF121真核表达载体构建正确;酶切证明pShuttle CMV-hBMP-4穿梭质粒构建正确;酶切证明真核双表达载体pIRESh-VEGF121/hBMP-4构建正确;RT... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
英文缩略词表
中文摘要
英文摘要
1 前言
2 材料与方法
3. 结果
4. 讨论
5. 结论
参考文献
附录
致谢
综述


【参考文献】：
期刊论文
[1]骨折愈合过程中BMP-2和VEGF的表达[J]. 曾中华,余黎,龚玲玲,肖璇,曾俊.  武汉大学学报(医学版). 2005(04)
[2]人BMP-7及VEGF基因共表达腺病毒的构建及在兔骨髓基质干细胞中的共表达[J]. 鱼兵,闫露,范清宇,龙华,文艳华.  中国矫形外科杂志. 2004(Z3)
[3]由BMP-4基因转入C2C12细胞引起的成肌细胞到成骨细胞的表型转变（英文）[J]. 汪炬,孙奋勇,戴云,余榕捷,孙晋华,李明.  中国病理生理杂志. 2004(05)
[4]骨形态发生蛋白-2对兔骨髓基质细胞生物行为的影响[J]. 刘建,常祺,胡蕴玉,孟国林,白俊.  中国临床康复. 2003(20)
[5]血管内皮生长因子及其受体Flt-1在乳腺癌中的表达及意义[J]. 吴后男,李玉林,朱桂彬,张丽红,张秀英,何旭.  中华医学杂志. 2002(10)



本文编号：3152316