胰岛素样生长因子-I在精原干细胞中的作用及其机理研究

发布时间：2021-06-05 19:27

　　目的： 摸索体外精原干细胞分离纯化的条件，并由此建立一套比较稳定的分离纯化方法与技术。研究IGF-I在维持体外培养的精原干细胞自我更新、增殖过程中所起到的调控作用，以及探讨IGF-I影响精原干细胞自我分裂的可能信号转导途径。初步探索精原干细胞体外存活的适宜环境，建立由生长因子为促存活因素而形成的体外培养体系。方法： 不连续密度Percoll梯度液分离纯化精原干细胞，并利用选择性贴壁法进一步纯化精原干细胞；c-Kit细胞免疫组化鉴定细胞类型，通过显微镜下随机10个视野细胞计数进行定量分析确定其纯度；台盼蓝排斥实验确定精原干细胞的活力；在体外培养的10d SD大鼠的原代精原干细胞培养过程中加入不同浓度的IGF-I，于72h进行MTT检测精原干细胞的存活数，观察IGF-I对精原干细胞的促增殖作用；本研究分别加入PD98059、SB203580、BisindolymaleimideⅢ等 （三者分别为Ras-MAPK、JAK-STAT、PKC等信号转导途径的特异抑制剂）进行阻断，于72h进行MTT检测，推断IGF-I影响精原干细胞增殖的可能信号转导途径。结果： 1、c-Kit细胞免疫组化结果显示... 

【文章来源】：南昌大学医学院江西省

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

IGF-I作用后大

【参考文献】：
期刊论文
[1]mRNA差异显示法克隆小鼠精子发生相关基因-p38MAPK基因[J]. 郑英,李建民,郭金虎,单玉喜,祝辉,王黎熔,周作民,林敏,沙家豪.  解剖学报. 2001(03)



本文编号：3212764