超广谱β内酰胺酶肠杆菌拮抗菌的鉴定及抑菌产物分析

发布时间：2021-06-23 01:16

　　本研究对从土壤中筛选出的超广谱β内酰胺酶肠杆菌的拮抗菌进行鉴定,并对其发酵产物抑菌效果进行研究。以分离到的污水中的15株产超广谱β内酰胺酶肠杆菌为测试菌株,土壤中分离到的1株拮抗菌为试验菌株,通过点接种法、平板对峙法和发酵产物抑菌试验测试试验菌株对测试菌住的拮抗作用;通过16S r DNA PCR产物测序及生理生化反应鉴定试验菌株种属;通过发酵产物氯仿粗提物薄层色谱分析试验,结合细菌次级代谢产物基因簇预测在线分析,初步研究试验菌株的抑菌成分。显示试验菌株鉴定为铜绿假单胞菌,对15株产超广谱β内酰胺酶肠杆菌均有拮抗作用,其发酵产物氯仿粗提物中组分之一具有明显抑菌作用,次级代谢产物基因簇在线软件分析推测该产物可能为Nrps、Bacteriocin、Phenazine、Siderophore、Hserlactone、Arylpolyene中的一种或几种。本研究提示铜绿假单胞菌含有多种已知或未知次级代谢产物,为开发利用铜绿假单胞菌资源提供研究资料。 

【文章来源】：基因组学与应用生物学. 2019,38(06)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

ESBLs肠杆菌的分离与纯化

鶳A7菌株的相似率为100%，该菌株来源于临床，基因组全长为6588339bp。以PA7作为参考菌株，从NCBI下载其全基因组序列(序列号:CP000744.1)，上传至antiSMASHBacteriaVersion4.0在线软件分析预测后，预测其次级代谢产物基因簇共有11个，隶属于7类基因簇：Nrps(非核糖体肽合成酶类)、Bacteriocin(细菌素类)、Phenazine(吩嗪类)、Siderophore(嗜铁素类)、Hserlactone(内脂类)、Arylpolyene(芳基多烯类)、Other(其它)。其中6个基因簇未知，与已知基因图3拮抗菌株G199的鉴定注:A:G199菌在364nm紫外光下有荧光;B:G199菌株溶血现象;C:G199菌株革兰氏染色;D:G199菌株在42℃正常生长Figure3IdentificationoftheantagoniststrainG199Note:A:FluorescenceofG199strainunder364nmUVlight;B:HemolysisphenomenonofG199strain;C:GramstainingresultofG199strain;D:G199straingrownormallyin42℃图416SrDNAPCR产物鉴定注:M:DL2000DNAMarker;1:空白对照;2:G199菌株16SrDNAPCR产物Figure4Identificationof16SrDNAPCRproductionofG199strainNote:M:DL2000DNAMarker;1:Control;2:16SrDNAPCRproductionofG199strain图2拮抗菌抑菌试验注:A:点接种法测试199株细菌对R1的拮抗作用,箭头所示为G199菌株对R1的拮抗作用;B:平板对峙法测试G199菌株对15株ESBLs的拮抗作用;C:G199菌株72h发酵产物对15株ESBLs的拮抗作用Figure2TheantibacterialtestsNote:A:Theantagonisticeffectof199strainsonR1wastestedbypointinoculation,andthearrowsshowedtheantagonismofG199toR1;B:TheantagonisticeffectsofG199onfifteenESBLs

ine(吩嗪类)、Siderophore(嗜铁素类)、Hserlactone(内脂类)、Arylpolyene(芳基多烯类)、Other(其它)。其中6个基因簇未知，与已知基因图3拮抗菌株G199的鉴定注:A:G199菌在364nm紫外光下有荧光;B:G199菌株溶血现象;C:G199菌株革兰氏染色;D:G199菌株在42℃正常生长Figure3IdentificationoftheantagoniststrainG199Note:A:FluorescenceofG199strainunder364nmUVlight;B:HemolysisphenomenonofG199strain;C:GramstainingresultofG199strain;D:G199straingrownormallyin42℃图416SrDNAPCR产物鉴定注:M:DL2000DNAMarker;1:空白对照;2:G199菌株16SrDNAPCR产物Figure4Identificationof16SrDNAPCRproductionofG199strainNote:M:DL2000DNAMarker;1:Control;2:16SrDNAPCRproductionofG199strain图2拮抗菌抑菌试验注:A:点接种法测试199株细菌对R1的拮抗作用,箭头所示为G199菌株对R1的拮抗作用;B:平板对峙法测试G199菌株对15株ESBLs的拮抗作用;C:G199菌株72h发酵产物对15株ESBLs的拮抗作用Figure2TheantibacterialtestsNote:A:Theantagonisticeffectof199strainsonR1wastestedbypointinoculation,andthearrowsshowedtheantagonismofG199toR1;B:TheantagonisticeffectsofG199onfifteenESBLsweretestedbyplateconfrontationmethod;C:TheantagonisticeffectsofG199strain72hfermentationproductonfifteenESBLs2642


本文编号：3243922