当前位置:主页 > 医学论文 > 病理论文 >

人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1基因P1启动子的TNF-α效应元件分析鉴定

发布时间:2021-07-07 22:44
  酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶(ACAT)是细胞内唯一催化游离胆固醇和脂肪酸合成胆固醇酯的酶,在胆固醇及酯类代谢平衡中起着非常重要的作用。广泛存在于细胞中的ACAT-1,与病理性的动脉粥样硬化(AS)病变关系密切。据文献报道,动脉粥样硬化病变形成的脂质斑块中含有大量的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等细胞因子,推测其可能促进单核/巨噬细胞内胆固醇酯积累而形成泡沫细胞,即动脉粥样硬化早期病变。相关研究已经观察到:TNF-α能显著增强人单核细胞株THP-1中ACAT-1基因的表达及其P1启动子的活性,并且人ACAT-1基因P1启动子的核心序列位于EXon 1上游-125~-79位47 bp的DNA片段。木课题的工作是:(1) 建立DEAE-Dextran介导的THP-1细胞转染外源荧光素酶报告基因质粒表达测活分析系统,利用pGFP质粒作为外源DNA检测其转染效率,并优化条件。(2) 通过PT-PCR方法检测THP-1受TNF-α刺激后其内源人ACAT-1基因表达水平的变化:利用NF-κB信号转导途径抑制剂TPCK、MG132和可表达突变型IκB质粒的共转染实验,观察到TNF-α增强P1启动子活... 

【文章来源】:华东师范大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:66 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1基因P1启动子的TNF-α效应元件分析鉴定


AcA’r一l基因的组织结构

照片,瞬时表达,照片,细胞


八B图1.2.2THp一l细胞瞬时表达绿色荧光蛋自照片(转染质牢仪为p(;Fp,条介I为D「AE一dexrra:1150pglml:孵育时陌J20min,细胞生长24小H、11丫J细胞照片、I:‘J·事见{!,断卜).冬!l.I.ZA一今衡光显微镜!!收片·:图:1.21玉.川l兮不台盼收染色15

柱状图,增强效应,基因表达,转录产物


++(50饭)U/一nl)25卜:M)F-a对单核细胞株THP一l中人ACAT.l基因lx1PI启动子转录产物及内标基因GAPDHrk软于I:对DNA条带进行扫描定斌,t作柱状图


本文编号:3270505

资料下载
论文发表

本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/binglixuelunwen/3270505.html


Copyright(c)文论论文网All Rights Reserved | 网站地图 |

版权申明:资料由用户7b998***提供,本站仅收录摘要或目录,作者需要删除请E-mail邮箱bigeng88@qq.com