氧化应激损伤后的内皮细胞对瓣膜间质细胞生长的调控

发布时间：2021-07-09 16:48

　　目的建立过氧化氢介导的瓣膜内皮细胞（ECs）氧化应激（OS）模型,探讨OS作用下ECs和间质细胞（VICs）之间的相互作用关系。方法不同浓度过氧化氢（H₂O₂）处理ECs不同时间后,收集OS-ECs上清;上清作用于VICs,通过检测细胞增殖、凋亡、分化及存活率,验证OS-ECs上清对VICs生长有一定影响。结果随着处理时间的延长,ECs和VICs均有不同程度受损。其中,50μmol/L H₂O₂处理ECs,OS-ECs上清可稳定VICs生长状态。结论 50μmol/L H₂O₂处理ECs并收集上清,作用于VICs是建立OS细胞模型的最佳条件。ECs对VICs有一定程度的保护作用。 

【文章来源】：中国老年学杂志. 2019,39(05)北大核心

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【部分图文】：

μmol/LH2O2氧化应激作用下ECs在光学显微镜下的形态(×40)

?界限清楚。48h略有皱缩，体积稍有缩小，72h后皱缩明显，形态不规则，部分细胞脱壁悬浮，细胞密度明显减小。见图1。图150μmol/LH2O2氧化应激作用下ECs在光学显微镜下的形态(×40)2.2OS-ECs上清液对VICs分化的作用Western印迹检测表明VICs在OS-ECs上清液处理48h后α-SMA表达显著升高，其表达量与24h相比差异显著(P＜0.05)。72h后α-SMA的表达量回落，并维持在初始水平，与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05)。见表1、图2。图2Western印迹法检测α-SMA的表达吴昊等氧化应激损伤后的内皮细胞对瓣膜间质细胞生长的调控第5期·5411·

2.3OS-ECs上清液对VICs凋亡的作用Western印迹法检测表明VICs在OS-ECs上清处理48h后Caspase-3表达显著升高，与24h相比差异显著(P＜0.05)。72h后表达量回落，并维持在初始水平，与24h比差异无统计学意义(P＞0.05)。见图3、表1。图3Western印迹法检测Caspase-3的表达2.4OS-ECs上清液对VICs增殖活性的作用Western印迹法检测表明VICs在OS-ECs上清液处理后PCNA的表达量随着时间的延长而降低，但48h、72h、96hPCNA的表达量与24h相比差异无统计学意义(P＞0.05)。见图4、表1。CCK-8结果表明，在OS-ECs上清液作用的各个时间点与24h相比，VICs的存活率差异均无统计学意义(P＞0.05)。见表1。图4Western印迹法检测PCNA的表达表1Western印迹法检测结果及VICs存活率比较(x±s，n=4)组别a-SMACaspase-3PCNAVICs存活率(%)24h0．7868±0．23910．8035±0．26800．9396±0．21030．5158±0．208148h1．3891±0．24111)1．2873±0．15771)1．0519±0．21120．5163±0．125572h0．9358±0．28760．5492±0．26210．8403±0．40740．4038±0．082496h0．8991±0．41790．6249±0．27590．6896±0．44750．4793±0．0543与24h比较:1)P＜0．053讨论VICs生物学行为的改变是导致瓣膜病最主要的原因〔9〕。本研究提示在H2O2的作用下，OS对Ecs的损伤随着时间的延长而加重。结果表明在ECs损伤早期，OS-ECs上清能促进VICs表达α-SMA和Caspase-3。α-SMA是肌纤维母细胞分化的表型标志物，在组织损伤修复过程中，通过合成分泌大

【参考文献】：
期刊论文
[1]过氧化氢介导人瓣膜间质细胞产生氧化应激细胞模型的建立[J]. 熊普熹,韩林,刘晓红,龚德军,潘卫军,徐志云.  第二军医大学学报. 2015(01)



本文编号：3274116