抗SIgA分泌片单克隆抗体ELISA药盒的构建及其临床研究

发布时间：2021-07-10 03:58

　　目的 通过纯化初乳获得SIgA分泌片（SC），免疫家兔制备抗SC多克隆抗体；再对抗SC单克隆抗体杂交瘤细胞株进行复苏和扩大培养，制备抗SC单克隆抗体。应用抗SC单克隆抗体的高度特异性和抗SC多克隆抗体的较高亲和力，通过配伍选择，构建成ELISA药盒。并应用药盒对宫颈癌患者宫颈分泌物SIgA进行初步研究，对不同病变期肝炎病人血清SIgA作进一步探讨。 方法 实验分三部分：（1）SIgA和SC的分离纯化及鉴定；（2）抗SC单克隆抗体ELISA药盒的构建；（3）抗SC单克隆抗体ELISA药盒的临床研究。 结果 初乳经凝胶过滤、离子交换层析和盐析，可分离得到SIgA和SC。所得产物经免疫双向扩散、SDS-PAGE和免疫印迹法鉴定，进一步确认为SIgA和SC。通过高分子蛋白相对迁移率曲线可计算出SC的分子量约为75kD。将纯化的SC免疫家兔制备抗SC多克隆抗体，经鉴定，该抗体ELISA效价为1：5000，且为针对SC抗原的特异抗体。通过对抗SC单克隆抗体杂交瘤细胞株2D₁和4G₃的复苏和扩大培养，制备抗SC单克隆抗体，测得抗体ELIS... 

【文章来源】：四川大学四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：48 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 SC和SIgA的分离、纯化及鉴定
    材料和方法
    结果
    讨论
    结论
    参考文献
第二部分 抗SC单克隆抗体ELISA药盒的构建
    材料和方法
    结果
    讨论
    结论
    参考文献
第三部分 抗SC单克隆抗体ELISA药盒的临床研究
    1 子宫颈癌患者局部分泌物SIgA的研究
        研究对象
        方法
        结果
        讨论
        结论
    2 肝病患者血清SIgA研究
        研究对象
        方法
        结果
        讨论
        结论
    参考文献
文献综述一 《SIgA分子结构与功能相互关系》
综述一参考文献
文献综述一 《SIgA临床研究进展》
综述二参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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[2]血清SIgA与肝胆疾病[J]. 李成文,代志琰,蔡美英.  泸州医学院学报. 2001(01)
[3]SIgA与临床疾病的关系[J]. 江咏梅,蔡美英.  四川省卫生管理干部学院学报. 2000(04)
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[5]大气污染对儿童健康所致潜在危害研究[J]. 席淑华,孙文娟,叶丽杰,王雨,崔金山,徐凯,吴咏今,王素凡.  环境与健康杂志. 2000(01)
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[7]慢性细菌性前列腺炎局部免疫状况对预后的影响[J]. 王家治,胡礼泉,李世文,刘德安.  医学新知杂志. 1999(04)
[8]采用白桂木凝集素-HRP测定唾液SIgA方法的建立[J]. 朱其芳,吴耀生,邓勇,周素芳.  广西医科大学学报. 1999(05)
[9]可溶性HLA-Ⅰ的检测及中国人正常值[J]. 兰炯采,石宁,郑世荣,陈强,刘红雨,武大林,曹琼,杨崇礼.  中国免疫学杂志. 1999(05)
[10]根尖周病变中分泌型IgA的研究[J]. 王静,葛久禹,王永宏.  口腔医学纵横. 1999(01)



本文编号：3275142