氯化锂介导经典Wnt/β-catenin信号通路在大鼠脂肪干细胞增殖和成骨中的作用

发布时间：2021-10-05 09:51

　　目的探讨在体外生长环境下不同浓度氯化锂对脂肪干细胞（ADSCs）增殖和成骨分化的作用及其可能的机制。方法①从3周龄SD大鼠腹股沟脂垫分离出脂肪组织,使用0.1%Ⅰ型胶原酶消化后置于含10%胎牛血清DMEM培养,以0、2.5、5、10、20、40 mmol/L浓度的氯化锂作用ADSCs24、48、72 h,用MTT法测定氯化锂对细胞增殖的作用;②ADSCs加入含0、2.5、5、10、20、40 mmol/L氯化锂的成骨培养液中培养7 d后测定细胞中碱性磷酸酶（AKP）的活性;③用RT-PCR法检测成骨诱导3 d后,不同浓度氯化锂作用7 d时ADSCs中β-catenin、糖原合成激酶3β、AKP的表达。结果在体外环境培养下,低浓度氯化锂（2.5、5、10 mmol/L）促进干细胞增殖,高浓度氯化锂（20、40 mmol/L）抑制细胞增殖。5、10 mmol/L氯化锂促进ADSCs中AKP的活性,但是40 mmol/L具有明显抑制AKP活性的作用。同时,氯化锂能上调β-catenin和AKP的表达。结论氯化锂在体外对大鼠ADSCs增殖有双重影响,并且促进AKP活性和ADSCs成骨分化,具有... 

【文章来源】：安徽医科大学学报. 2014,49(05)北大核心

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

倒置显微镜下第3代ADSCs形态×100

第2、3天氯化锂作用效果较明显，低浓度氯化锂(2．5、5、10mmol/L)可以引起大鼠ADSCs有丝分裂，有利于细胞增殖，第3天时效果显著;高浓度氯化锂(20、40mmol/L)抑制细胞的增殖。见图2。图2不同浓度氯化锂对大鼠ADSCs增殖的影响(n=3，x珋±s)与2d的对照组(0mmol/L)比较:*P＜0．05;与3d的对照组(0mmol/L)比较:△P＜0．05表2不同浓度氯化锂对大鼠脂肪干细胞AKP活性的影响(n=3，x珋±s)氯化锂(mmol/L)AKP活性(U/100ml)02．330±0．5202．52．903±0．52754．616±0．732*103．346±0．629*202．070±0．585401．443±0．130*与对照组(0mmol/L)比较:*P＜0．052．3AKP活性检测大鼠ADSCs经过氯化锂处理7d后检测，与对照组比较，5、10mmol/L组对细胞AKP活性的促进作用较显著。见表2。2．4ＲT-PCＲ检测与对照组比较，β-catenin的mＲNA表达量随着氯化锂浓度的升高而上升(F=64.74)。GSK-3β的mＲNA表达量随着氯化锂浓度的升高而降低(F=47.51)。AKPmＲNA表达在5mmol/L组时最高，随后依次下降(F=68.83)。见图3。图3不同浓度氯化锂作用ADSCs7d后mＲNA的表达M:Marker;1～6:氯化锂浓度依次为0、2.5、5、10、20、40mmol/L;与对照组(0mmol/L)比较:*P＜0．05·592·安徽医科大学学报ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2014May;49(5)

第2、3天氯化锂作用效果较明显，低浓度氯化锂(2．5、5、10mmol/L)可以引起大鼠ADSCs有丝分裂，有利于细胞增殖，第3天时效果显著;高浓度氯化锂(20、40mmol/L)抑制细胞的增殖。见图2。图2不同浓度氯化锂对大鼠ADSCs增殖的影响(n=3，x珋±s)与2d的对照组(0mmol/L)比较:*P＜0．05;与3d的对照组(0mmol/L)比较:△P＜0．05表2不同浓度氯化锂对大鼠脂肪干细胞AKP活性的影响(n=3，x珋±s)氯化锂(mmol/L)AKP活性(U/100ml)02．330±0．5202．52．903±0．52754．616±0．732*103．346±0．629*202．070±0．585401．443±0．130*与对照组(0mmol/L)比较:*P＜0．052．3AKP活性检测大鼠ADSCs经过氯化锂处理7d后检测，与对照组比较，5、10mmol/L组对细胞AKP活性的促进作用较显著。见表2。2．4ＲT-PCＲ检测与对照组比较，β-catenin的mＲNA表达量随着氯化锂浓度的升高而上升(F=64.74)。GSK-3β的mＲNA表达量随着氯化锂浓度的升高而降低(F=47.51)。AKPmＲNA表达在5mmol/L组时最高，随后依次下降(F=68.83)。见图3。图3不同浓度氯化锂作用ADSCs7d后mＲNA的表达M:Marker;1～6:氯化锂浓度依次为0、2.5、5、10、20、40mmol/L;与对照组(0mmol/L)比较:*P＜0．05·592·安徽医科大学学报ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2014May;49(5)


本文编号：3419498