抗人内皮细胞特异性分子-1单克隆抗体的制备及其特性鉴定和初步应用

发布时间：2021-10-10 23:15

　　目的 研制抗人内皮细胞特异性分子-1（Endothelial cell specific molecule-1，ESM-1）单克隆抗体，并对其生物学特性进行鉴定；探讨ESM-1蛋白在肿瘤标本中的表达。方法 采用B淋巴细胞杂交瘤技术，以人ESM-1蛋白为抗原，免疫BALB／C小鼠，取脾细胞与SP2／0，经PEG融合，在HAT选择培养基中培养两周，用ELISA方法鉴定阳性克隆、有限稀释法筛选单克隆细胞株，并对其进行特性分析：分析染色体核型；用Sigma公司的鼠单抗定型Immunotype^TM试剂盒进行亚型分析；用Westen blot方法检测单克隆抗体的特异性；用间接ELISA方法，测定了相对亲和常数；并通过免疫荧光鉴定ESM-1在内皮细胞ECV304中的表达。用免疫组织化学法检测肾癌组织中ESM-1的变化，同时用HE染色观察细胞结构。结果 获得了7株稳定分泌抗人ESM-1的杂交瘤细胞株，其中3A7细胞株特异性尤为显著，效价高达1：6000。其染色体数目为100条左右，所分泌抗体亚型为IgG2b，亲和常数为1.67x10⁴L／mol，对内皮细胞中... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 (抗人内皮细胞特异性分子-1单克隆抗体的制备及其特性鉴定)
    摘要(中文)
    摘要(英文)
    1 引言
    2 材料与方法
    3 结果
    4 讨论
    5 结论
    参考文献
第二部分 (抗人内皮细胞特异性分子-1单克隆抗体的初步应用)
    摘要(中文)
    摘要(英文)
    1 引言
    2 材料与方法
    3 结果
    4 讨论
    5 结论
    参考文献
本课题的进一步设想
致谢
附录
综述(内皮细胞和肿瘤转移)
    一、 细胞黏附分子
    二、 蛋白溶酶
    三、 血管生成
    参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]人内皮细胞特异性分子-1表达载体的构建、体外表达及初步纯化[J]. 张素梅,王雪,胡若磊,朱华庆,熊江霞,周青,桂淑玉,汪渊.  安徽医科大学学报. 2002(06)
[2]肿瘤患者与正常人血小板表面粘附蛋白表达异同的临床观察及意义[J]. 张培彤,裴迎霞,朴炳奎,孙桂芝,林红生,祁鑫.  中华肿瘤杂志. 1998(03)
[3]E-选择素基因结构功能、表达调控和构效关系[J]. 蔡铀庆,胡美茹,汲言山,沈倍奋.  国外医学(分子生物学分册). 1996(02)



本文编号：3429334