人退变椎间盘基因表达谱的研究

发布时间：2021-10-19 21:07

　　目的：研究人类正常和退变椎间盘的基因表达谱，分析人退变椎间盘基因表达水平的变化，探讨椎间盘退变的机制。 方法：手术切除的病人无菌新鲜退变及正常椎间盘标本各3例，按条件优化的一步法抽提椎间盘组织的总RNA并纯化mRNA，经逆转录分别用cy3，cy5荧光标记，获得两组椎间盘cDNA的探针，与含有4096条人类全长基因的cDNA表达谱芯片杂交，通过计算机分析判定差异表达的基因，并对所获得的基因进行生物信息学分析。HE染色检测椎间盘细胞数，TUNEL法检测细胞凋亡率，并对凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白进行免疫组织化学检测，验证基因芯片筛选结果的可靠性。 结果：在4096条基因中，退变与正常椎间盘组织间存在差异表达的基因群。在所检测的3对临床标本中，发现有差异表达的基因706条，已知功能基因中，358条基因表达量明显下降（ratio＜0.5），298条基因表达量明显上升（ratio＞2.0）。与凋亡相关的差异表达基因8条，其中Bax蛋白相关基因表达增高，EMP-1相关基因表达呈明显的上调，Bcl-2蛋白相关基因表达降低。退变椎间盘髓核细胞大量减少，凋亡率明显上升，Bcl-2蛋白在... 

【文章来源】：中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校

【文章页数】：91 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

正常椎间盘纤维环组织HE染色(只120)

第二军医大学硕士学位论文图1一1正常椎间盘纤维环组织HE染色(只120)Fzgl一1ImagesofHEstaininginnormallumbarintervertebralarmulusfibrosus(X120)图1一2退变椎间盘纤维环组织HE染色(x120)Flgl一2ImagesofHEstainingindegeneratedlumbariniervertebralannulusfibrosus(火120)

Figl一3ResultsofthetotalRNAagarosegeleleetroPhoresisindegeneratedandnormallumbarintervertebraldise.图1一4基因表达谱芯片双色荧光扫描Figl一4Scanningresultsofh沙ridizing51，alsongenechiPindegeneratedandnormallumbarin把rvertebraldisc.

【参考文献】：
期刊论文
[1]退变腰椎间盘组织中细胞凋亡及相关基因Fas和Fas-L表达的研究[J]. 李小川,西中海,吕刚,金明熙,谢林,金哲,张澍澄.  中国医科大学学报. 2003(01)
[2]大鼠退变颈椎间盘组织基因表达谱的研究[J]. 王拥军,施杞,李家顺,贾连顺.  第二军医大学学报. 2002(12)
[3]腰椎间盘内Ⅸ型胶原基因表达的观察[J]. 西永明,胡有谷,吕振华,郑红军,陈岩,齐宗华.  中华外科杂志. 2002(09)
[4]腰椎间盘内弹性蛋白分布的观察与定量分析[J]. 邱玉金,胡有谷,张金兰,吕振华,陈伯华.  中国脊柱脊髓杂志. 2000(02)
[5]转化生长因子β与椎间盘细胞Ⅰ型胶原基因调控的关系[J]. 陈岩,胡有谷,齐宗华,西永明.  中国矫形外科杂志. 2000(02)
[6]腰椎间盘弹性蛋白五肽的测定及临床意义[J]. 伦立民,郭英华,邱玉金,胡有谷,刘喜双,王学宏.  中华骨科杂志. 1997(08)
[7]腰椎间盘 Ⅵ 型胶原的定量分析[J]. 彭新生,胡有谷,吕振华.  青岛医学院学报. 1997(01)
[8]椎间盘髓核与纤维环中蛋白多糖的研究[J]. 王民生,胡有谷,陈培勋.  中国脊柱脊髓杂志. 1992(03)



本文编号：3445603